肝内胆管细胞癌是一种恶性程度极高的肝内肿瘤,发病率仅次于肝细胞癌位列肝脏恶性肿瘤第二位,近30年在我国发病率逐年上升。目前手术切除肿瘤被公认为治疗肝内胆管癌的唯一手段,但鉴于淋巴结早期转移、肿瘤侵袭性高等特点,患者预后不尽人意。因此,探索合适的预后标志物,研究肿瘤微环境、寻找抑制淋巴管新生、阻断淋巴结转移途径是改善患者长期预后的热点。通过分析106例因肝内胆管癌行肿瘤切除术的临床队列,我们发现PDPN阳性表达的癌相关成纤维细胞(CAFs)是患者预后不良的独立危险因素,含有PDPN阳性CAFs的患者总体生存率和无复发生存率显著更差,此外PDPN阳性CAFs与肿瘤相关淋巴管新生呈正相关,PDPN阳性CAFs可能通过新生淋巴管促进淋巴结转移。这些结果提示PDPN阳性CAFs可作为肝内胆管癌临床预后的标志物之一,具有重要的临床价值。我们接下来首次在体外分离并纯化了人肝内胆管癌CAFs细胞,进一步分选出PDPN阳性CAFs亚群,此群细胞可显著促进胆管癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,与之前的临床分析相一致。我们同时在患者标本及小鼠模型中发现肿瘤组织中存在“间质-淋巴内皮样”过渡细胞。最后我们通过无血清培养发现PDPN阳性CAFs可形成管腔样结构,同时表达淋巴管特异性标志物,从而证实PDPN阳性CAFs通过“间质-淋巴内皮转化”新途径参与形成新生淋巴管,从而促进淋巴结转移并导致患者预后不良。综上所述,我们首次说明了PDPN阳性CAFs在肝内胆管细胞癌中重要的预后作用,同时创新性的发现PDPN阳性CAFs通过“间质-淋巴内皮转化”新途径转化为新生淋巴管,进而促进淋巴结转移和患者不良预后,这将为未来针对肿瘤相关成纤维细胞以及淋巴管新生开发新型靶向治疗方案提供重要依据。