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背景及目的调节性T细胞(CD4+CD25+Treg细胞)占CD4+T细胞总数的5％-10％左右，在其构成中固定表达CD25。CD4+CD25+Treg细胞在控制针对自身抗原的免疫耐受中起着重要的作用，表现出了其在防止自身免疫性疾病方面的重要性。因为肿瘤相关抗原也是由自身抗原发展而来，这也就提示我们CD4+CD25+Treg细胞在帮助肿瘤逃避自身抗体的攻击方面也许发挥着一定的作用。有证据显示发展较快的肿瘤往往伴有CD4+CD25+Treg细胞数量的急剧增加。在动物模型中我们也发现移除CD4+CD25+Treg细胞有助于增强肿瘤免疫。现在已经知道，环磷酰胺除了作为烷化剂所表现出来的直接性的细胞毒作用以外，还同时具有免疫调节方面的功能，比如它可以清除CD4+CD25+Treg细胞。在这方面，国际上研究得较多的便是小剂量环磷酰胺的作用剂量及药效的持续时间。有研究发现，使用小剂量环磷酰后，第4d其作用强度达到最大值，CD4+CD25+Treg细胞数量又显著降低，仅为正常值的50％左右。而在第10d环磷酰胺的作用基本消失，CD4+CD25+Treg细胞数量也基本恢复到原来水平。以上便是有关于环磷酰胺与CD4+CD25+Treg细胞的研究现状，本次实验便是基于上述理论所设计的，主要从动物实验方面进行验证。本次实验的目的即为了探讨单次小剂量注射常规化疗药物环磷酰胺(cyclophosphamide CY)对于小鼠调节性T细胞(CD4+CD25+Treg细胞)的影响，同时研究其在肿瘤预防方面的作用。材料和方法实验分为两大部分：A单纯注射小剂量环磷酰胺的CY组小鼠及仅注射生理盐水的对照组小鼠。在环磷酰胺注射后的第4d，用Western blotting技术检测scurfin蛋白在两组小鼠脾脏中的表达；用流式细胞术检测两组小鼠脾脏中CD4+CD25+Treg细胞表达的百分比并进行比较。B注射完环磷酰胺24h后接种肿瘤的CY+肿瘤组及注射完生理盐水24h后接种肿瘤的生理盐水+肿瘤组。在实验过程中，每日观察小鼠饮食、活动及一般状况。连续测量肿瘤体积和小鼠体重，分别绘制肿瘤生长曲线和小鼠体重变化曲线，观察CY+肿瘤组的抑瘤效果并与生理盐水+肿瘤组进行比较。接种后20d两组全部小鼠处死，称量瘤重，取其脾脏淋巴细胞，用MTT法检测刀豆蛋白A(conA)诱导的淋巴细胞增殖情况并进行对比。实验数据采用SPSS10.0统计软件进行统计学处理。结果1．根据流式结果统计，CY组CD4+CD25+Treg细胞相对数量为(1.651±0.427)％，对照组的值为(1.280±0.447)％，两组之间有统计学意义。说明CY组与对照组相比，其CD4+CD25+Treg细胞的百分比有所降低。2．根据Western blotting结果分析，设对照组的谱带强度值为1，则CY组的值为0.74±0.043，两者之间有统计学意义。说明CY组与对照组相比，其scurfin蛋白的表达量有所降低。3．生理盐水+肿瘤组肿瘤生长曲线较为陡直；CY+肿瘤组肿瘤生长曲线比较平缓，且出瘤时间延缓。4．CY+肿瘤组小鼠体重变化不明显，且小鼠的一般状况较好；生理盐水+肿瘤组小鼠体重逐渐增加，后期体重负荷较大，体重下降。5．CY+肿瘤组小鼠脾细胞的增殖能力相对增高。结论1．单次低剂量环磷酰胺能有效降低正常小鼠体内调节性T细胞的相对数量。2．单次低剂量环磷酰胺能有效降低正常小鼠体内scurfin蛋白的表达量。3．单次低剂量环磷酰胺的预先作用能够有效地抑制小鼠RMA淋巴瘤的生长，且毒副作用小。4．单次低剂量环磷酰胺的预先作用能够延缓小鼠RMA淋巴瘤的发生时间。