研究的背景及目的 谷氨酸是在脊椎动物整个中枢神经包括视网膜中主要的兴奋性神经递质,高浓度的谷氨酸可以对视网膜神经节细胞产生兴奋毒性作用。因此严格调节视网膜中谷氨酸的浓度对于维持正常的视网膜功能是很重要的,谷氨酸神经传输的终止灭活是靠表达在神经细胞和胶质细细胞上的谷氨酸转运体将细胞胞外的谷氨酸转运到细胞内。因此谷氨酸转运体在维持正常生理性信号的传递及避免谷氨酸的兴奋性毒性起着重要的作用。正常情况下视网膜细胞外谷氨酸的摄取主要是由Muller细胞来完成的,这是因为Muller细胞表达谷氨酰胺合成酶,它对Muller细胞转运谷氨酸起着重要的作用。谷氨酸转运功能的障碍及谷氨酰胺合成酶活性下降均会造成细胞外液谷氨酸浓度的升高。大量的研究表明谷氨酸水平过高是青光眼神经损害的重要机制,本研究通过建立慢性高眼压模型来探讨大鼠视网膜中谷氨酸转运及相关酶的改变。 材料和方法 健康雄性大鼠78只,体重250-300g,对所有大鼠左眼行表层巩膜静脉结扎,使其眼压升高,作为实验组,而对侧眼不作处理作为对照组。定期测量并记录眼压。其中12只大鼠于眼压升高2月处死取其眼球,石蜡包埋切片,进行HE染色并观察视网膜厚度的改变。 66只大鼠分成三组,分别于眼压升高后1周、5周、9周处死,其中每组中8只大鼠提取其双眼视网膜总RNA用逆转录聚合酶链反应对其作谷酸转运体GLAST mRNA及谷氨酰胺合成酶GS mRNA半定量检测;每组中的6只取双眼视网膜通过分光光度计检测谷氨酰胺合成酶的酶活性;每组的另8只取其视网膜制备神经突触体通过液体闪烁计数仪检测其对L-[~3H]—谷氨酸的转运能力。 结果 1.一次性结扎表层巩膜静脉可以使大鼠眼压中度升高至少2个月,而不需要再次手,术后即刻实验组的眼压可升高到对照眼的2.8倍,术后1周是对照眼的2.2倍,虽然实验眼眼压在术后一段时间内部分下降,但其眼压差可维持在10mmHg以上。通过视网膜HE染色眼压升高后2个月实验组视网膜厚度较对照眼明显变