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目的：舌体鳞癌是最常见的口腔恶性肿瘤,近年来国内外发病率均有上升及年轻化的趋势,但通过规范的综合治疗,5年生存率仅为60%左右,积极探索新的治疗靶点已成为目前新的研究方向。TRB3(Tribbles related protein3,果蝇相关蛋白3)是果蝇蛋白类似物家族成员,在多种恶性肿瘤组织中高表达,并且与肿瘤预后相关。内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)是细胞对外界环境变化做出反应的重要组成部分,TRB3是ERS信号传导通路中的重要信号分子,当细胞应激持续不能解除时,ERS诱导TRB3水平反应性升高,促使细胞发生凋亡。但TRB蛋白家族成员都无ATP结合位点,它必须通过与其他激酶结合后才能发挥作用。AKT (Serine/threonine Kinase,丝氨酸/苏氨酸激酶)通路与头颈鳞癌的发生发展关系密切,TRB3有可能通过与AKT磷酸化位点结合,抑制其磷酸化水平,进而调节下游信号分子诱导细胞凋亡。本研究首先回顾性分析舌体鳞癌的临床治疗及生存情况,评价不同治疗方式的疗效及影响预后的因素；然后检测TRB3及AKT在舌体鳞癌组织中的表达,分析其表达水平与临床预后的关系；并进一步研究在舌体鳞癌细胞中,TRB3表达与AKT磷酸化的关系,探讨TRB3诱导细胞凋亡的分子机制。方法：第一部分：收集2000年1月至2005年12月于中山大学附属肿瘤医院头颈外科初次诊治的舌体鳞癌254例,使用SPSS16.0软件统计,用Kaplan-Meier法计算累计总体生存率(生存时间按首次治疗时间至死亡时间或末次随访时间计算)、无瘤生存率(生存时间按首次治疗时间至发现复发、转移或死亡或末次随访时间计算),计算生存率组间差异采用Log—Rank检验,χ2检验比较组间率的差异,多因素分析用Cox回归模型,以P<0.05为差异有统计学意义。第二部分：收集2010年5月至2010年7月中山大学附属肿瘤医院头颈外科术后舌体鳞癌组织及癌旁黏膜组织(距肿瘤组织肉眼距离>2cm)各18例,采用反转录PCR检测TRB3mRNA、采用Western blot检测TRB3、磷酸化AKT蛋白(phospho-AKT, p-AKT)蛋白,比较不同组织间表达水平的差异；收集2000年1月至20002年12月中山大学附属肿瘤医院头颈外科舌体鳞癌术后石蜡标本128例,癌旁黏膜组织(距肿瘤组织肉眼距离>2cm)石蜡标本30例,采用免疫组化检测TRB3、p-AKT蛋白在舌体鳞癌及癌旁黏膜组织中的表达,分析其表达水平与临床预后的关系。第三部分：在舌体鳞癌细胞Tca8113及CAL-27中,使用毒胡萝卜素或衣霉素诱导内质网应激反应,采用实时录PCR及Western blot检测TRB3mRNA及蛋白表达水平变化,验证TRB3能否为内质网应激反应所诱导；分别采用腺病毒质粒转染上调TRB3表达,采用短发夹RNA干扰下调TRB3表达,同时采用Western blot检测TRB3及p-AKT蛋白表达水平变化,验证TRB3与AKT磷酸化的关系。结果：第一部分：254例舌体鳞癌的3年、5年总体生存率分别为71.4%、66.1%；3年、5年无瘤生存率分别为67.3%、53.3%；Ⅰ期舌体鳞癌患者68例,5年总体生存率为89.6%,Ⅱ期舌体鳞癌103例,5年总体生存率为68.2%,两者统计学差异显著,P=0.002；Ⅲ期舌体鳞癌患者66例,5年总体生存率为51.4%,Ⅳ期舌体鳞癌17例,3年总体生存率为5.9%,两者统计学差异显著,P<0.001；31例单纯手术的Ⅲ、Ⅳ期舌体鳞癌患者5年总体生存率为57.7%,26例手术+化疗(或放疗)的患者5年总体生存率为41.4%,9例化疗+放疗的患者3年生存率为6.2%,仅有1人活过5年,三者统计学差异显著,P<0.001。多因素分析显示T分期、N分期、病理分级、复发是影响舌体癌预后的独立因素。第二部分：逆转录PCR显示TRB3mRNA在15例舌体鳞癌组织表达较癌旁黏膜组织中升高(83.3%,15/18)；Western blot显示TRB3蛋白及p-AKT蛋白在13例舌体鳞癌组织中的表达均较癌旁黏膜组织中升高(72.2%,13/18)；免疫组化显示128例舌体鳞癌石蜡组织中,TRB3蛋白高表达率为49.2%(63/128),p-AKT蛋白高表达率为68.8%(88/128),均较癌旁黏膜表达增高(P均≤0.001),且均与舌体鳞癌的T分级、N分级及复发相关,p-AKT蛋白及TRB3蛋白的表达呈负相关(r=-0.27,P<0.01)。第三部分：在舌体鳞癌细胞Tca8113及CAL-27中,通过毒胡萝卜素(5μmol/1)或衣霉素(5μg/ml)诱导24h后,TRB3mRNA及蛋白表达升高。在Tca8113细胞中,通过腺病毒质粒上调TRB3蛋白表达后,p-AKT蛋白表达下降；通过短发夹RNA干扰下调TRB3蛋白表达后,p-AKT蛋白表达升高。结论：1、舌体鳞癌治疗以手术治疗为主,高危患者术后辅助放化疗,T分期、N分期、病理分级、复发是影响舌体鳞癌预后的独立因素；2、TRB3及p-AKT在舌体鳞癌中高表达并且与舌体鳞癌预后相关,p-AKT表达与TRB3表达负相关；3、在舌体鳞癌细胞发生内质网应激后,诱导TRB3蛋白表达升高并且抑制AKT磷酸化,这为舌体鳞癌的靶向治疗提供了新的研究依据。