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[目的]维生素D是一种具有广泛功能的类固醇激素,它通过维生素D受体(VDR)调节许多生理功能,如钙稳态、骨代谢以及细胞的分化与增殖。近来发现VDR也存在于雄性动物生殖系统内,开启了维生素D对雄性动物生殖功能影响的研究。但是,生物活性的维生素D(1α,25-(OH)2D3)对于睾丸细胞的直接作用仍不清楚。因此,本研究旨在探究1α,25-(OH)2D3对睾丸总细胞活力、增殖、凋亡、cAMP.糖代谢及抗氧化能力的影响；探究1α,25-(OH)2D3对睾丸间质细胞活力、睾酮生成及睾酮生成相关基因的影响；探究1α,25-(OH)2D3对睾丸支持细胞ABP分泌及吞噬能力的影响。[方法]对体外培养的绵羊睾丸总细胞、间质细胞、支持细胞进行不同浓度的1α,25-(OH)2D3(0nM,1 nM,10 nM,100 nM)刺激后,使用CCK-8鉴定睾丸总细胞与间质细胞的活力；使用细胞计数确定睾丸总细胞的增殖情况；采用凋亡荧光染色与凋亡相关基因荧光定量确定睾丸总细胞的凋亡情况；采用Elisa方法检测睾丸总细胞cAMP生成、睾丸间质细胞睾酮分泌及睾丸支持细胞ABP分泌的情况；采用比色法测定睾丸总细胞糖代谢相关酶与抗氧化相关酶活力；采用荧光定量方法检测间质细胞睾酮合成相关基因的表达情况；采用油红O染色结合对甘油三脂与总胆固醇的检测,确定睾丸支持细胞吞噬能力的变化情况。[结果]1α,25-(OH)2D3使绵羊睾丸总细胞活力、胞内cAMP浓度、葡萄糖吸收、乳酸生成、己糖激酶活力、丙酮酸生成、乳酸脱氢酶活力、柠檬酸合酶活力、琥珀酸脱氢酶活力、总抗氧化能力、过氧化氢酶活力、超氧化物歧化酶活力显著提升(P<0.05/P<0.01),但是睾丸总细胞数目、凋亡相关基因p53、bax、bcl-2的表达、丙酮酸激酶活力、谷胱甘肽过氧化物酶活力、谷胱甘肽S-转移酶活力无显著变化。1α,25-(OH)2D3使绵羊睾丸间质细胞的活力及LH诱导的睾酮分泌显著上升(P<0.05/P<0.01),同时睾酮生成相关基因StAR、3β-HSD与CYP17α基因mRNA表达水平也显著上升(P<0.05/P<0.01),但是睾酮生成相关基因P450scc与17β-HSD基因的表达量无显著变化。1α,25-(OH)2D3使绵羊睾丸支持细胞ABP分泌能力显著增强(P<0.05),但是支持细胞的吞噬作用无显著变化。[结论]1α,25-(OH)2D3使睾丸总细胞活力、胞内cAMP水平、糖代谢及抗氧化水平提高,但对睾丸总细胞增殖及凋亡无影响。1α,25-(OH)2D3使睾丸间质细胞活力增强,同时通过提高睾酮生成相关基因StAR、3β-HSD与CYP17α基因mRNA的表达水平,增强LH诱导的睾酮分泌。1α,25-(OH)2D3使睾丸支持细胞ABP分泌增强,但是对其吞噬作用无影响。