分析试剂与生物大分子相互作用的研究

来源 :华南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangzhaohai
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本文以分析试剂茜素红、酸性铬兰K作为蛋白质探针,酚藏花红为DNA探针,研究了它们的相互作用,结果如下: 1.在pH=2.68的缓冲溶液中,茜素红(AR)与牛血清白蛋白(BSA)发生了相互作用,研究表明二者主要靠静电作用力结合,且它们的结合符合Pesavento提出的相分配模型。根据相分配模型我们推导了有机小分子在蛋白质微相和水相中的分配比D的计算公式,并通过吸光度A、分配比D、表观结合常数K和热力学参数ΔG、ΔH、ΔS来讨论了系列浓度下的阴离子型表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)对该体系的影响,认为SDS主要通过静电作用力和疏水作用力影响AR与BSA的相互作用。 2.分别在酸、碱条件下研究了酸性铬兰K(ACBK)与牛血清白蛋白(BSA)结合的光度性质,籍此探讨了不同体系环境下ACBK与BSA相互作用的机理差异。研究表明在pH=3.78的条件下BSA使ACBK的吸光度降低且λmax红移,pH=9.91条件下BSA使ACBK的λmax蓝移。分光光度法和平衡透析法皆表明结合反应符合Pesavento提出的相分配模型。此外,通过表观结合常数K、热力学参数ΔG、ΔH、ΔS的计算以及对ACBK酸碱平衡式、BSA构象的分析,认为在pH3.78条件下ACBK与BSA主要以静电作用力结合,在pH=9.91条件下二者主要以疏水作用力结合。 3.在pH=7.00的Britton-Robinson缓冲液中,酚藏花红(PS)与DNA能形成一种非电活性的超分子复合物。用循环伏安法对体系进行了研究,发现PS主要以阳离子形式吸附在裸银电极表面。在实验条件下,PS有一对峰形良好的氧化还原峰。DNA的加入对其氧化还原式量电位E的影响不大,但随DNA浓度的增大,峰电流ip下降,其中氧化峰的下降值Δipa与DNA的浓度在一定范围内(0.50-8.00mg/L)呈线性关系。此外,本文还对PS与DNA相互作用的机理进行了初步探讨,认为二者主要以静电作用力结合。
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