【摘 要】
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目的:体外培养甲状腺相关眼病(TAO)病人与正常人眼眶前脂肪细胞;研究不同浓度的诱导液对前脂肪细胞的诱导作用以及白介素6(IL-6)、生长抑素对前脂肪细胞分化以及粘附分子表达
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目的:体外培养甲状腺相关眼病(TAO)病人与正常人眼眶前脂肪细胞;研究不同浓度的诱导液对前脂肪细胞的诱导作用以及白介素6(IL-6)、生长抑素对前脂肪细胞分化以及粘附分子表达的作用;研究前脂肪细胞诱导前后基因表达谱的变化;定量研究促甲状腺激素受体(TSHR)在培养细胞和眼眶组织中的表达;以期对眼眶前脂肪细胞在TAO发病中的作用进行初步探讨。 方法:原代培养13个TAO病人与7个正常人眼眶成纤维细胞与前脂肪细胞,用电镜比较其超微结构;比较地塞米松、胰岛素、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、IL-6和生长抑素对前脂肪细胞转化率的影响;用流式细胞术检测培养细胞中粘附分子的情况;用SBC-R-HC-100 -20cDNA基因芯片检测前脂肪细胞诱导前后基因表达谱的变化;用荧光定量PCR技术检测TAO病人与正常人眼眶组织与培养的细胞中TSHR表达的情况。 结果:(1)体外成功培养TAO病人与正常人眼眶成纤维细胞与前脂肪细胞,并成功诱导前脂肪细胞向脂肪细胞转化,获得本实验最佳的诱导液浓度:地塞米松0.1μmol/L;胰岛素10μg/ml;IBMX 0.25mmol/L。(2)IL-6不能促进前脂肪细胞向脂肪细胞转化,对培养细胞粘附分子的表达亦没有影响;而生长抑素能抑制前脂肪细胞向脂肪细胞转化。(3)在前脂肪细胞诱导前后基因表达谱中有279条基因发生了改变,其中上调基
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