盐霉素联合三氧化二砷杀伤肾癌KCC853细胞的实验研究

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目的:研究盐霉素(Salinomycin;Sal)联合三氧化二砷(Arsenic trioxide;As2O3)在体外对人肾癌KCC853细胞的效应及可能机制;观察盐霉素联合三氧化二砷在体内对人肾癌KCC853细胞裸鼠种植瘤生长的影响。方法:(1)采用四氮噻唑蓝(MTT)法检测盐霉素、三氧化二砷及联合用药时对KCC853细胞的增殖抑制作用;(2)运用细胞集落抑制试验、细胞划痕实验、Hoechst33258染色法及流试细胞仪观察盐霉素联合三氧化二砷对KCC853细胞生物学行为的影响;(3)采用人肾癌KCC853细胞裸鼠种植瘤模型,评价两药合用时对肿瘤生长的影响。结果:(1)盐霉素与三氧化二砷单用时对KCC853细胞具有较好的增殖抑制作用,两药的Imax分别为97.48﹪和95.60﹪,IC50分别为15.94μg/ml和0.88μg/ml;(2)低剂量的盐霉素与三氧化二砷对KCC853细胞的增殖和迁移具有良好的抑制作用,在细胞集落抑制实验中,盐霉素与三氧化二砷对KCC853细胞的集落抑制率分别为37.23﹪和43.83﹪,联合用药组比盐霉素与三氧化二砷单药组效果更显著,其抑制率为57.50﹪,P<0.05,有统计学意义;(3)Hoechst33258染色法染色后发现,与对照组相比,在盐霉素与三氧化二砷单药组中,细胞数量明显减少,细胞核表现浓密致染,细胞发生凋亡;联合用药组与盐霉素、三氧化二砷单药组相比细胞凋亡更显著;(4)在流式细胞仪检测盐霉素与三氧化二砷对KCC853细胞凋亡率和细胞线粒体膜电位影响的实验中,两种药物诱导KCC853细胞的凋亡率分别为12.05﹪和26.77﹪,联合用药组为49.01﹪,与盐霉素、三氧化二砷单药组相比效果更显著,P<0.01,有统计学意义;盐霉素与三氧化二砷诱导KCC853细胞线粒体膜电位下降的比率分别为20.54﹪和25.96﹪,联合用药组为46.26﹪,与盐霉素、三氧化二砷单药组相比效果更显著,P<0.01,有统计学意义;(5)盐霉素与三氧化二砷对人肾癌KCC853细胞裸鼠种植瘤的生长具有明显的抑制效应,盐霉素与三氧化二砷的抑制率分别为40.74﹪和44.44﹪,联合用药组的抑制率为49.15﹪,P<0.05,有统计学意义。结论:(1)盐霉素与三氧化二砷对人肾癌KCC853细胞具有明显的抑制效应,并表现出一定的浓度依赖性。(2)盐霉素联合三氧化二砷能协同性的抑制KCC853细胞生长、迁移并促进其凋亡。(3)盐霉素与三氧化二砷能明显抑制人肾癌KCC853细胞裸鼠种植瘤的生长。
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