豆渣RNA酶解物制备及其抗氧化活性研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:weyyiverson
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
核酸及核苷酸具有抗氧化功能,在食品及药品领域具有很大的应用和开发潜力。DNA作为核酸的一种,近年来受到广大科研人员的关注。豆渣是一种良好的植物核酸资源,其核酸含量占豆渣干重的1%左右。对于豆渣的研究,国内外主要集中于膳食纤维、蛋白质、多糖等的提取和测定方面,尚未见有关豆渣DNA的提取及功能特性的研究。而开展豆渣DNA的相关研究对增加豆渣的附加价值及核酸资源的开发具有十分重要的现实意义。故本试验以豆渣为主要原料,研究了豆渣DNA的提取、纯化、酶解,并分析和比较了豆渣DNA与其酶解物的体内、外抗氧化活性的差异。   (1)在豆渣细胞裂解试验中,以DNA提取率为检测指标,在单因素试验的基础上,利用响应面优化法对豆渣细胞的裂解工艺参数进行了优化。确定了豆渣细胞裂解的最佳工艺条件:SDS浓度1.85%,裂解液pH值6,裂解温度81℃,裂解时间70min,液料比20∶1。在此条件下,DNA提取率达到了0.625%。   (2)在豆渣DNA纯化试验中,以蛋白质脱除率和豆渣DNA保留率为指标,比较等电点法、三氯乙酸法及高盐法纯化效果,综合考虑选择最优纯化方法——高盐法:用2/3体积的3mol/L,pH值4.8的醋酸钠进行DNA纯化,蛋白脱除率达85%,DNA保留率为83%。   (3)在豆渣DNA酶解试验中,以酶解率和羟自由基(·OH)清除率为指标,用牛胰DNA酶进行酶解,在单因素的基础上进行了四因素三水平的正交试验设计,结果表明,最佳的酶解条件为:酶解温度42℃,pH值7,加酶量3000U/g,底物浓度3%,酶解时间3.5h。在此条件下,豆渣DNA的OD260为1.57,·OH清除率为49.25%。   (4)在豆渣DNA及其酶解物的体外抗氧化试验中,主要研究了其还原能力、DPPH·清除能力、超氧阴离子自由基(O2ˉ·)清除能力及.OH清除能力。结果表明,豆渣DNA酶解前、后都具有一定的抗氧化能力,在相同浓度下,酶解后的抗氧化功效要优于酶解前,但低于Vc的抗氧化能力。DNA酶解物的还原力是DNA的2.5倍,.OH清除率是DNA的2.2倍,O2ˉ·清除率是DNA的2.1倍,DPPH.清除率是DNA的2.4倍。   (5)在豆渣DNA及酶解物的体内抗氧化试验中,以受试小鼠血清、肝脏及脑中的CAT、SOD、GSH-Px活性和MDA含量为指标,比较了豆渣DNA酶解前、后及Ve对小鼠的抗氧化作用。结果显示:豆渣DNA及酶解物都能对正常小鼠起到抗氧化的功效,小鼠体内MDA含量明显下降,CAT、SOD、GSH-Px的活性都有不同程度的升高,并存在量效关系。在相同浓度下,DNA酶解物组中SOD、GSH-Px和CAT活性的增加幅度以及MDA含量的减少幅度都明显优于DNA组,且高剂量组之间达到了显著水平(P<0.05),说明DNA酶解后的抗氧化水平明显高于DNA。且酶解物高剂量组的抗氧化水平与Ve组差异不显著(P>0.05)。证实了DNA及酶解物的抗氧化活性。
其他文献
灰树花是一种珍稀的食药两用真菌,其多糖具有辅助抗肿瘤治疗、增强人体免疫功能等作用,在液体培养过程中可将无机硒转化为对人体有益的有机硒。米糠、麸皮是稻谷、小麦加工过
利用可再生能源是世界能源发展的趋势。随着可再生能源装机容量增大其波动性增加,导致弃风、弃光等问题,严重影响可再生能源消纳。为解决可再生能源消纳,在现有的调度体系下,基于电力市场手段的可再生能源弃风、弃光电量交易,利用弃风、弃光电量供热,能有效促进可再生能源消纳,减少煤炭等化石燃料消耗,保护环境。本文对含可控电供热装置的可再生能源供热的电-热联合系统协调优化调度进行研究,以提高可再生能源的消纳程度及
现代社会的迅猛发展对电能质量提出了更高要求,电能质量问题成为相关领域研究的热点。针对这一问题,近年来提出了“用户电力”等一些新概念及其新技术。动态电压恢复器(Dynamic Voltage Restorer,简写为DVR)是其中一种能够解决电压质量问题的装置。本文阐述了电能质量问题及DVR的优越性,分析并提出了考虑暂态分量时DVR补偿参考信号的检测方法。对无差拍控制方法用于动态电压恢复器逆变器控制
目的:分析探究给予慢性盆腔炎患者整体护理措施的临床应用效果.方法:选择在本院存有完整病例档案的慢性盆腔炎患者展开对照研究,符合此次研究要求者共计76例,以患者所采用的
目的:研究糖尿病护理门诊对于社区2型糖尿病患者自我管理的应用效果.方法:选取在糖尿病护理门诊就诊的143例社区2型糖尿病患者为研究对象.在糖尿病护理门诊对糖尿病患者进行
目的:探讨实施前瞻性综合性护理对急性心肌梗死合并糖尿病患者便秘的影响.方法:选取2018年1月~2019年12月在我院治疗的90例急性心肌梗死合并糖尿病患者作为研究对象,将其随机
目的:探讨分析良好的护患沟通对提升高血压患者临床日常护理的效果.方法:采用数字随机法,将2019年1月~2019年12月期间于我院接受治疗的高血压患者进行分组,观察组60例给予加强
目的:探讨对行手术治疗的肛瘘患者实施疼痛护理干预对患者创面疼痛、术后恢复的影响.方法:将本院2018年4月至2019年5月收治的80例肛瘘手术患者随机分成实验组与对照组,每组各
目的:探讨强化护理风险管理在肿瘤内科患者护理工作中的应用效果;方法:本次研究对收拾的96例肿瘤内科患者进行护理观察,全部患者随机纳入对照组(n=48)和管理组(n=48),对照组
基于Internet变电站自动化,是变电站自动化发展的最新趋势。本文讨论了这种最新趋势的软件结构体系与实现。编制了基于Internet变电站自动化软件中的Web应用程序。对这个应用程序采用的关键技术:MVC模块视图控制器模式,JSP/Servlet的编程方法,数据库连接池和JavaBean技术进行了分析论述。实际运行证明,该应用程序的正确与合理性。同时表明,此Web应用程序可以作为基于Intern