异养硝化好氧反硝化菌X1-L的筛选鉴定及脱氮特性研究

来源 :哈尔滨工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong431
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随着我国经济的迅猛发展,工业废水及生活污水的排放总量日趋上升,水体中氨氮和有机物的含量严重超标,异养硝化好氧反硝化技术作为新型脱氮技术,不仅能将氨氮转化为气态产物,而且对COD的去除效果较好[1]。目前革兰氏阳性菌中的芽孢杆菌对于氨氮和COD的去除能力较强,国内外学者在工业及市政污水处理中将其作为优势菌种[2]。异养硝化好氧反硝化菌具有生长迅速、抗逆性强、脱氮效率高等特点而被人们广泛关注,但目前对于单一菌种的报道较少,因此深入研究纯菌种的脱氮性能,对于丰富种质资源以及应用于实际工程中具有重要意义。本课题从驯化成熟的活性污泥中富集筛选出几株细菌,通过测定其生长曲线及异养硝化和好氧反硝化能力,选出一株效能较好的菌株X1-L进行深入研究。对菌株X1-L进行形态特征观察,确定其为短杆状,体内有芽孢,表面凹凸不平,无鞭毛,经微生物鉴定板测定,可知菌株X1-L能利用的碳源有54种,并通过系统三种特性参数分析,确定菌株X1-L属于芽孢杆菌属。为了确定菌株X1-L所属菌种,对其进行16S rRNA基因序列测定,通过Blast软件将其他细菌的16S rRNA基因序列与菌株X1-L进行比对,并利用MEGA 7.0软件建立系统发育树,发现其与Bacillus flexus在亲缘关系上比较相近,相似性高达99.86%,因此确定菌株X1-L为Bacillus sp.,在Genbank上的登录号为MT457091。为了确定菌株X1-L的生长及脱氮效能,需要测定其在24h内的生长曲线,并在以不同形态氮为唯一氮源的培养基中,测定菌株X1-L生长及脱氮情况,结果表明经过24h培养COD去除率达到95%以上,NH4+-N、NO2--N、NO3--N的去除率分别为99.6%、95.5%、96.5%,说明菌株X1-L利用不同氮源的能力均较强。为了提高菌株X1-L的氨氮去除能力,对其生长环境进行条件优化,设置不同p H值分别为5、6、7、8、9,不同碳源分别为柠檬酸钠、乙酸钠、丁二酸钠、葡萄糖、酒石酸酒钠,不同C/N比分别为7、9、11、13、15,不同温度分别为15℃、20℃、25℃、30℃、35℃,在上述不同条件下分别测定菌株生长的OD660以及对NH4+-N、NO2--N,NO3--N、COD的去除情况,结果显示在p H值为8、碳源为丁二酸钠、C/N比为11、温度为30℃时,菌株X1-L的生长能力及氨氮去除效果最好。
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