【目的】慢性炎症与恶性肿瘤的发生发展关系密切,本课题旨在探讨TLR-9在口腔鳞癌中的过表达及其对肿瘤浸润pDC功能的影响机制。【方法】课题组首先利用Q-PCR、western blotting及免疫组化检测正常口腔上皮组织、口腔鳞癌组织中TLR-9 mRNA及蛋白的表达水平与趋势。随后应用生物信息学结合启动子荧光素酶报告基因试验绘制TLR-9基因结构图,初步明确TLR-9基因的候选启动子区;继续应用ABI3730测序及启动子-荧光素酶载体构建从DNA突变角度筛选有意义突变位点;最后应用免疫磁珠分选结合流式细胞定量技术、实时PCR技术试验,研究TLR-9在口腔鳞癌中的过表达及其对肿瘤浸润pDC的影响。【结果】口腔黏膜上皮癌变过程中TLR-9受体的表达呈上升趋势,且-1432至-725区间序列可能为TLR-9基因启动子的核心区域;随后的ABI3730测序发现TLR-9启动子核心区域上游250~310bp范围内发生了DNA的高频突变,TLR-9启动子-荧光素酶报道基因表达载体实验表明MUT4可能在TLR-9过表达过程中发挥重要的调控作用;pDC细胞在正常口腔上皮组织内数量极少,在癌变组织内的数量明显增多但功能却明显降低,癌变细胞内TLR-9过表达可以介导癌变细胞抑制pDC细胞内TLR-9受体的表达;口腔癌细胞培养上清液(OCDS)可以显著降低pDC细胞TLR-9的表达及CpG-ODN刺激前后pDC IFN-a和IL-6的分泌量;IL-10和TGF-β同时被阻断时,OCDS介导的对IFN-α产生的抑制作用被大部分逆转,提示口腔癌微环境对pDC免疫功能特异性抑制作用的影响很可能主要通过IL-10和TGF-β协同介导。【结论】TLR-9在口腔癌变过程中的表达呈上升趋势,启动子区DNA的突变引起的TLR-9基因转录调控异常可能是其过表达的重要原因;过表达的TLR-9可通过抑制pDC胞内TLR-9表达而抑制其分泌IFN-a;且癌变细胞上清液IL-10和TGF-β的分泌抑制了口腔鳞癌浸润pDC的免疫调控分泌功能,可以成为口腔鳞癌早期监测与防治的潜在标靶。