NSCLC患者T淋巴细胞亚群的分布及临床意义

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【目的】机体抗肿瘤免疫主要依赖于T淋巴细胞介导的细胞免疫。目前,机体的免疫状态在恶性肿瘤的发生发展中仍不完全清楚。本研究检测非小细胞肺癌(Non-small celllung cancer, NSCLC)患者外周血T淋巴细胞亚群及其亚型的细胞水平,同时检测患者肿瘤组织中Th17细胞(CD4~+IL-17~+)的水平。探讨在NSCLC发生发展中细胞免疫功能的改变,并寻找评价NSCLC患者免疫功能状态的有效指标。【方法】收集于2011年5月~2011年12月在苏州大学附属第一医院初治的原发性非小细胞肺癌患者99例,同龄健康志愿者22例作为正常对照组。采用流式细胞术检测法检测肺癌患者外周血CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、Th1细胞(CD4~+IFN-γ~+),Th17细胞(CD4~+IL-17~+),Treg细胞(CD8-Foxp3~+),Tc1细胞(CD8~+IFN-γ~+)及Tc17细胞(CD8~+IL-17~+),酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测血清IL-17表达水平。应用免疫组化(Immunohistochemistry, IHC)染色分析肺癌患者肿瘤组织、近端癌旁组织及远端癌旁组织中Th17细胞(CD4~+IL-17~+)的细胞水平,real-timePCR (real-time fluorescence quantitative, PCR)检测肿瘤组织、近端癌旁组织及远端癌旁组织中IL-17mRNA的表达水平。【结果】1、NSCLC患者外周血CD4~+T细胞水平低于正常对照组,但无显著性差异;CD8~+T细胞水平明显低于正常对照组(19.21±0.82%vs26.39±1.32%,P<0.001),CD4~+/CD8~+高于对照组(2.74±0.17%vs1.67±0.10%,P<0.05),进一步分析发现,NSCLC患者外周血中的CD4~+和CD8~+T细胞随着临床分期的增加而降低,但无显著性差异;在不同病理类型间亦无显著性差异。2、NSCLC患者外周血Th1细胞水平(12.01±0.87%)明显低于正常对照组(15.73±1.27%)(P<0.05)。3、NSCLC患者外周血Treg细胞水平(3.58±0.21%)明显高于正常对照组(1.98±0.23%)(P<0.05),并随着临床分期的增加而升高,但无显著性差异。4、NSCLC患者外周血Th17细胞水平(1.95±0.14%)明显高于正常对照组(0.96±0.09%)(P<0.05),而且Th17细胞水平在Ⅲ、Ⅳ期患者明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者(2.05±0.17%vs1.38±0.18%)(P<0.05),而不同病理类型间无显著性差异。5、NSCLC患者血清IL-17水平(1.81±0.31pg/ml)高于正常对照组(1.08±0.18pg/ml),但无统计学意义。6、NSCLC患者外周血Tc17细胞水平(0.56±0.05)明显低于正常对照组(0.84±0.13)(P<0.05),而Tc1细胞水平与正常对照组相比无显著性差异,7、NSCLC患者外周血Th1/Treg(3.70±0.27)明显低于正常对照组(7.68±1.10)(P<0.05),而且随着临床分期的增加而降低。8、NSCLC患者肿瘤组织的Th17细胞(8.69±1.26)显著高于近端癌旁组织(2.70±0.53)及远端癌旁组织(0.62±0.15)(P<0.05),且近端癌旁组织显著高于远端癌旁组织(P<0.05)。肿瘤组织IL-17mRNA的表达水平(0.30±0.07)明显高于近端癌旁组织(0.11±0.02)及远端癌旁组织(0.06±0.02)(P<0.05)。【结论】1.NSCLC患者外周血辅助性T细胞(CD4~+T、Th1细胞)和细胞毒性T细胞(CD8~+T、Tc17细胞)均下降,抑制性细胞(Treg、Th17细胞)上调,提示NSCLC患者的免疫功能下降。2.NSCLC患者外周血和肿瘤组织中Th17细胞水平显著升高,并且与患者临床分期升高有关,提示Th17细胞可能在非小细胞肺癌的发生发展中起一定的作用,其表达水平可成为评估NSCLC患者免疫功能的新指标。3.NSCLC患者外周血Tc17细胞明显低于正常对照组,提示Tc17细胞可能参与非小细胞肺癌的发生发展。4.NSCLC患者外周血Th1/Treg明显低于正常对照组,随着临床分期的增加而下降,有望成为评估NSCLC患者免疫功能的有效指标。
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