心脏周细胞对大鼠心肌梗死后心功能及血管密度的影响

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目的:观察应用原代提取的大鼠的心脏周细胞对心肌梗死的治疗效果,应用SD大鼠的心肌梗死模型,将周细胞植入大鼠梗死的心肌,研究周细胞移植对梗死后心肌组织的影响:1)移植前后心功能变化2)梗死区胶原纤维及炎症细胞变化3)梗死区血管密度变化。  方法:原代提取的心脏周细胞(pericyte),来源于三周龄的SD大鼠,经胶原酶消化2次后分离培养,扩增数量至第三代。取第三代周细胞做移植准备。用20只SD大鼠(雄性)做急性心肌梗死模型,将20只SD大鼠随机分为两组,每组10只大鼠。1)周细胞组:应用左冠状动脉前降支结扎法建立SD大鼠的心肌梗死模型,结扎后5分钟,在梗死区及梗死周围区分别注入周细胞,然后逐层缝合肌肉皮肤,关闭胸腔。2)对照组:也结扎左冠状动脉前降支建立SD大鼠的心肌梗死模型,结扎后5分钟,在梗死区和梗死周围区注入磷酸盐缓冲溶液(PBS),然后关闭胸腔。两组SD大鼠均于移植前和移植后4周做心脏超声检查,检测:左心室收缩末期容积,左心室舒张末期容积,左心室短轴缩短率,左心室射血分数。术后4周取大鼠的心脏组织做冰冻切片,并做抗CD31的免疫荧光染色,观察梗死区的血管密度。做Masson染色观察梗死区胶原纤维变化,做HE染色观察炎症细胞浸润。  结果:1)与对照组组对比,移植前后周细胞组大鼠左心室舒张末期容积、左心室收缩末期容积扩大较小,左心室短轴缩短率及射血分数也仅有很少的降低。2)与对照组对比,周细胞植入组梗死区域心肌纤维化较少。3)与对照组比较,HE染色显示周细胞植入组梗死区域炎性细胞浸润较少。4)与对照组比较,周细胞植入组梗死区域的血管密度增加。  结论:1)周细胞移植治疗能够减少左心室扩张,增加心肌收缩力,显著改善心功能。2)在心肌梗死区域,周细胞移植治疗可以减少心肌纤维化,减少炎症细胞浸润。3)周细胞能够促进血管新生。
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