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目的:从中医基础理论和现代医学角度分析并总结中枢性性早熟的病因病机、治则治法。本文建立雌性大鼠中枢性性早熟(central precocious puberty,CPP)模型,通过观察滋阴清肝方对雌性CPP大鼠性发育、褪黑素及受体、体质量等相关指标的影响,探讨褪黑素及其受体与性早熟之间的关系;了解褪黑素和受体表达及体质量在滋阴清肝方治疗性早熟中的作用,进一步明确滋阴清肝方的作用机制。方法:1理论研究系统回顾古今文献,了解中西医理论对CPP的病因病机、治则治法的认识,为实验研究提供理论依据。2实验研究SD雌性大鼠共32只,出生后随机分为正常组、模型组、西药组、中药组,每组8只。大鼠5日龄时,除正常组外,其余3组大鼠皮下注射300μg达那唑建立大鼠CPP模型。15日龄时,西药组、中药组大鼠分别给予亮丙瑞林(100μg/kg)和滋阴清肝方(3.2g/ml)进行干预。当模型组阴门开启动物超过半数(>50%)时终止实验。自造模之日(5日龄)起,每日通过肉眼观察各组大鼠阴门开启情况并记录开启时的日龄(vaginal opening,VO);阴道涂片法观察第1个发情间期的出现并记录出现时的日龄(first diestrus,D1);每4天监测各组大鼠体质量。实验结束时麻醉后处死大鼠,取卵巢、子宫称重计算脏器系数;制作常规组织病理切片观察子宫、卵巢的组织形态并计算子宫壁厚度和卵巢黄体个数;检测血清中的褪黑素(MT)、促黄体生成素(LH)和骨钙素(bgp)水平;通过荧光实时定量pcr法检测下丘脑促性腺激素释放激素(gnrh)mrna的表达;检测下丘脑褪黑素受体mt1、mt2mrna的表达。统计学处理:采用spss18.0统计软件进行统计学分析,组间数据采用单因素方差分析,所有数据均以均数±标准差(x±s)表示,以p<0.05为差异有统计学意义。结果:1、理论研究回顾古今研究cpp的相关文献,对cpp的病因病机、治则治法的认识均认为肝脾肾为发病的关键。现代中医认为性早熟的病机主要有阴虚火旺、肝郁化火、脾虚痰结型3个常见证型。而在长江以南地区,性早熟的证型以阴虚火旺合并肝郁化火多见。滋阴清肝方由知母,黄柏,夏枯草,白芍,生地,丹皮组成,是总结导师向楠教授及专科10余年治疗icpp经验的基础方。在临床观察和动物实验中都已初步证实,滋阴清肝方对cpp有较好的治疗效果。2、实验研究(1)与正常组比较,模型组大鼠31日龄阴门开启日龄明显提前、子宫系数增加(p<0.05),卵巢系数明显增加(p<0.01),子宫壁厚度、卵巢黄体数均增加(p<0.05,p<0.01),血清lh,bgp明显上升(p<0.01),下丘脑gnrhmrna表达水平升高(p<0.01),病理切片上可见子宫卵巢组织体积增大,夜间血清mt降低(p<0.01),下丘脑mt受体mt1mrna的表达上升(p<0.01)。(2)与模型组比较,中药组大鼠的阴门开启日龄延迟,子宫系数降低(p<0.05),卵巢系数降低(p<0.01),子宫壁厚度和黄体生成数降低(p<0.05,p<0.01),lh和bgp降低(p<0.05),夜间血清mt升高(p<0.05),并且下丘脑gnrhmrna表达水平下降(p<0.05),下丘脑mt受体mt1mrna的表达上升(p<0.05),病理切片上可见子宫卵巢组织体积缩小。(3)与正常组、模型组、西药组比较,中药组组大鼠自25日龄(滋阴清肝方灌胃10日后)至实验结束,体质量明显降低(P<0.05)。结论:(1)在中医基础理论指导下,应用滋阴清肝方治疗CPP既有理论基础,也有实验研究支持。(2)造模后大鼠出现性发育提前,性腺组织增大,性激素水平升高,骨发育亢进,GnRHmRNA表达水平升高的特点;同时夜间血清MT降低,下丘脑MT受体MT1 mRNA的表达下降。提示雌性CPP大鼠造模成功,MT及其受体与性早熟密切相关。(3)滋阴清肝方对雌性CPP大鼠具有明确的治疗作用,可使性发育减缓,性腺组织减小,性激素水平下降,骨发育趋缓,同时夜间血清MT升高,下丘脑MT受体MT1 mRNA的表达上升。滋阴清肝方可能通过升高夜间血清MT,上调下丘脑MT1 mRNA的表达,从而抑制GnRH的释放,延缓HPGA的启动,达到治疗CPP的目的。(4)滋阴清肝方对雌性CPP大鼠的体质量有降低作用,可能与治疗CPP相关。