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本论文从资源开发利用角度对巴戟天进行扦插生根繁殖及根、茎、叶中主要活性成分的分布与积累研究,进而达到以下目的:(1)优化巴戟天扦插繁殖技术,初步探讨巴戟天扦插条生根机理,为巴戟天种苗快速繁殖及产业化生产提供依据;(2)考察不同产地、不同生长年限的巴戟天根、茎、叶中甲基异茜草素、水晶兰苷、多糖的含量,揭示它们的分布与积累规律,为巴戟天GAP栽培、合理采收及地上部分(藤茎、叶)资源的综合开发利用提供参考依据。1.巴戟天扦插生根繁殖研究:以扦插条生根率、生根数、最长根根长为考察指标,研究IBA处理对不同母本年龄和保留不同节数的巴戟天扦插条生根的影响。实验结果表明:在50mg/L IBA处理下,3年生保留3个节的扦插条的生根效果最佳,插条平均生根率、平均生根数及平均最长根根长分别为93.3%、23.18条、2.21cm。在生根过程中,POD活性呈先上升后下降的变化趋势;PPO活性呈先升高后下降再升高的变化趋势;IAAO活性呈先下降后升高的变化趋势。IBA处理组插条内POD、PPO活性比对照组的高,而IAAO活性比对照组的低,说明IBA处理改变了POD、PPO及IAAO的活性进而影响插条生根。2.巴戟天根、茎、叶中甲基异茜草素的分布与积累研究:采用高效液相色谱法(HPLC)对不同产地不同生长年限的巴戟天根、茎、叶中的甲基异茜草素进行含量测定,HPLC色谱条件为:Agilent TC-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水(52:48),流速:1.0ml/min,检测波长:278nm,柱温:25℃,进样量:20μl。实验结果表明,所分析的巴戟天根、茎、叶样品中甲基异茜草素的含量范围分别为:1.41~9.98μg/g、0.69~3.87μg/g、0.11~1.02μg/g。巴戟天中甲基异茜草素主要分布于根中,茎和叶中含量较少。在种植2-4年间,巴戟天根中甲基异茜草素的含量从2.16μg/g增加到9.98μg/g,于种植5-6年开始下降。3.巴戟天根、茎、叶中水晶兰苷的分布与积累研究:1.薄层色谱法定性鉴别,采用硅胶G薄层板,以三氯甲烷-甲醇-水-冰醋酸(8:2:0.5:0.5)为展开剂,以Trim-Hill试液为显示剂,日光下检视;2.采用高效液相色谱法(HPLC)对不同产地不同生长年限的巴戟天根、茎、叶中的水晶兰苷进行含量测定,HPLC色谱条件:Waters C8色谱柱(4.6mm×150mm,3.5um),流动相:甲醇-0.1%磷酸水溶液(5:95),流速0.8ml/min,检测波长235nm,柱温25℃,进样量10μl。实验结果表明:1.薄层色谱法鉴别中可见巴戟天根、茎、叶样品与水晶兰苷对照品的色谱图上均有相对应斑点;2.所分析的巴戟天根、茎、叶样品中水晶兰苷的含量范围分别为:8.54~16.64mg/g、8.48~19.95mg/g、12.06~25.23mg/g。广东与广西的巴戟天中水晶兰苷主要分布于叶中,而福建的巴戟天茎中水晶兰苷含量较高。在种植2-6年间,巴戟天根中水晶兰苷的含量不断积累,从9.17mg/g增长到16.47mg/g。4.巴戟天根、茎、叶中多糖的分布与积累研究:采用硫酸-苯酚法对不同产地不同生长年限的巴戟天根、茎、叶中的多糖进行含量测定。以葡萄糖为对照品,在波长489nm处对样品进行测定,通过换算因子计算出样品中多糖的含量。实验结果表明,所分析的巴戟天根、茎、叶样品中多糖的含量范围分别为:7.68~24.97%、4.44~12.28%、6.11%~16.79%。巴戟天根、叶中多糖含量较高,茎中含量较低。在种植2-5年间,巴戟天根中多糖的含量从7.68%增长到24.97%,于种植第6年开始下降。结论:(1)论文通过研究IBA处理对不同母本年龄及保留不同节数的巴戟天扦插条生根的影响,初步确定了巴戟天扦插条的年龄、节数及处理激素的浓度组合,即在50 mg/LIBA处理下,3年生保留3个节的扦插条的生根效果最好,其生根率达93.3%。(2)巴戟天根、茎、叶中均含有甲基异茜草素、水晶兰苷及多糖。其中,甲基异茜草素和多糖主要分布在根中,水晶兰苷主要分布在叶中。在种植2-6年间,甲基异茜草素和多糖的含量呈先上后降的变化趋势,水晶兰苷的含量则不断积累。