邻苯二甲酸二丁酯孕期暴露致仔鼠睾丸过氧化物酶-6表达差异的研究

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目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)胚胎期暴露对胎鼠睾丸蛋白表达谱的影响,分离并鉴定差异表达蛋白质。方法:妊娠14~18天按800mg/(kg·d)染毒孕鼠,妊娠19天取出胚胎大鼠睾丸,提取总蛋白,进行二维凝胶电泳分离和图像分析,筛选出的差异蛋白质点利用质谱技术进行鉴定,利用生物信息学获取相关信息,并选择关键蛋白进行验证。结果:共筛选出33个差异表达蛋白(t≥2.831,p<0.05),其中14个通过质谱分析和SwissProt蛋白数据库检索得到鉴定,如过氧化物酶6、膜联蛋白v、泛素羧基末端水解酶L1等,这些蛋白主要与细胞凋亡、细胞增殖与分化和信号转导等有关。运用Western blotting,我们验证了Prx6在实验组表达量明显高于对照组,通过免疫组化方法,发现Prx6主要定位在胎鼠睾丸Leydig细胞中。结论:蛋白质组学方法为研究DBP的毒理机制提供了良好的平台,我们分离并鉴定出多个关键蛋白,其中Prx6可能通过发挥抗氧化作用及刺激细胞增殖功能抵抗DBP的毒性作用,其功能有待进一步研究,本实验获得的其他蛋白质亦有待进一步验证及深入研究。
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