结直肠癌（Colorectal cancer,CRC）是消化系统第二大常见恶性肿瘤;然而,由于大多数患者在疾病早期无明显的临床症状,并且缺乏较早期的检测指标或特征性的分子标志物,致使患者在被诊断时已是晚期而失去手术等治愈星治疗的时机。研究发现,RNA甲基化参与RNA转录及转录后修饰等各种生物过程。m6ARNA甲基转移酶METTL3作为m6ARNA甲基化酶的核心基因,其被证实与多种癌症的发生、发展有关;然而,其在CRC中的功能的研究尚不充分。因此,本研究旨在全面系统性探索METTL3在CRC中的生物学功能,并探索其潜在分子机制。目的:本研究拟利用生物信息学分析m6A相关基因在CRC中的差异及可能的生物学功能;并以此筛选出m6ARNA甲基化过程的关键基因作为研究对象,探讨其参与CRC细胞恶性增殖的生物学功能及潜在分子机制,为CRC的临床诊断和治疗提供重要参考依据。方法:在癌症基因组图谱（the Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库中获取m6ARNA甲基转移酶相关基因表达数据,分析并筛选核心差异基因METTL3作为目的基因。分析m6ARNA甲基转移酶METTL3在CRC组织中的表达差异,进一步通过临床样本验证METTL3在CRC组织中的差异表达。合成METTL3过表达及沉默稳转病毒,并在CRC细胞系SW480中构建稳转沉默METTL3细胞株,在CRC细胞系HCT116中构建稳转过表达METTL3细胞株;然后通过细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期及细胞侵袭、迁移等细胞实验全面评估METTL3在CRC细胞中的功能。通过（Gene Set Enrichment Analysis,GSEA）通路富集分析,分析METTL3调节CRC细胞恶性增殖可能的生物途径;然后通过皮尔森相关性检验分析METTL3与下游靶分子的相关性,构建假设分子机制;最后,采用实时荧光定量PCR及western blotting方法检测METTL3对下游通路关键分子在m RNA水平及蛋白水平的影响。结果:1)通过在TCGA数据库中对m6ARNA转移酶数据进行分析显示,m6ARNA甲基转移酶METTL3在CRC中呈显著的高表达,且与患者的临床病理分期相关;另外,对METTL3在临床组织水平的分析也获得同样的结论;2)在CRC细胞系SW480中沉默METTL3可显著抑制CRC细胞的恶性增殖;相反,在CRC细胞系HCT116中过表达METTL3可显著促进CRC细胞的恶性增殖;3)在CRC细胞系SW480中沉默METTL3可将CRC细胞周期阻滞在G1/S期;相反,在CRC细胞系HCT116中过表达METTL3则可促进CRC细胞G1/S期遗传物质的合成;4)在CRC细胞系SW480中沉默METTL3可显著抑制CRC细胞的迁移;相反,在CRC细胞系HCT116中过表达METTL3可显著促进CRC细胞的迁移;5)对METTL3进行GSEA通路富集分析发现,在CRC中METTL3可能通过P53信号途径促进CRC细胞的恶性增殖;进一步对METTL3及P53信号通路中的靶分子进行相关性分析显示,METTL3与P53、CDK4及MYC显著相关,并且P53、CDK4与MYC间也存在显著的相关性;6)通过实时荧光定量PCR及western blotting实验在m RNA及蛋白水平证实,沉默METTL3可促进P53的表达并抑制CDK4及MYC的表达;相反,过表达METTL3可抑制P53的表达并促进CDK4及MYC的表达。结论:m6ARNA甲基转移酶METTL3在CRC中表达量升高,并可通过促进CRC的细胞增殖、转移并抑制凋亡参与了CRC的发生发展;METTL3在P53信号通路中靶向CDK4通过MYC促进CRC细胞的恶性增殖,本研究为CRC的临床诊断及分子靶向治疗提供了潜在的理论依据。