目的:血浆中含量最丰富的胆固醇初级代谢产物27-羟基胆固醇(27-Hydroxycholesterol,27HC或27-OHC)是内源性选择性雌激素受体调节剂和LXR激动剂。27HC与肺癌的发生发展密切相关,27HC以ERβ依赖的方式促进肺癌细胞增殖。然而,在ER阴性的A549细胞中发现27HC可以通过激活LXR通路降低胞内胆固醇水平并抑制细胞增殖。已有的研究表明27HC在肺癌细胞增殖、侵袭和迁移以及胆固醇代谢过程中发挥重要作用,但其在A549细胞糖代谢方面的研究目前尚未报道。本课题旨在研究27HC在A549细胞糖代谢过程中的影响。检测了经27HC、LXR激动剂T0901317和siLXRα处理后A549细胞中LXR、GLUT1、HK2、PKM2、LDHA和PCK2蛋白的表达,ATP水平、葡萄糖摄取以及乳酸生成情况,并进一步探讨LXR信号通路在这一过程中的可能作用机制,以深入发现27HC在癌症发病及预后中存在的潜在作用。方法:1、采用不同浓度(0~15μM)27HC以及(0~25μM)T0901317处理A549细胞12~48h;2、CCK8试剂盒检测A549细胞活力;3、siLXRα干扰A549细胞中LXRα的表达;4、ATP测试盒检测细胞内ATP水平;5、葡萄糖和乳酸测试盒分别检测培养液内葡萄糖和乳酸含量;6、Western blot检测LXRα以及糖代谢相关蛋白GLUT1、HK2、PKM2、LDHA、PCK2的表达。结果:1、27HC抑制A549细胞的增殖活力,呈浓度(1~15μM,24h)及时间(0~48h,5μM)依赖性;2、T0901317抑制A549细胞的增殖活力,呈浓度(1~25μM,24h)依赖性;3、27HC抑制A549细胞糖代谢:27HC通过激活LXRα,降低A549细胞的ATP水平,减少葡萄糖摄取和乳酸分泌,抑制GLUT1、HK2、PKM2、LDHA和PCK2蛋白表达,且呈浓度(1~15μM,24h)及时间(0~48h,5μM)依赖性;4、T0901317抑制A549细胞糖代谢,其与27HC的效应一致:T0901317激活LXRα,降低A549细胞的ATP水平,减少葡萄糖摄取和乳酸分泌,抑制GLUT1、HK2、PKM2、LDHA和PCK2蛋白表达;5、敲低LXRα减弱了27HC和T0901317对A549细胞糖代谢的抑制作用:与27HC或T0901317处理组相比,siLXRα组A549细胞ATP水平升高,葡萄糖摄取和乳酸分泌增加,GLUT1、HK2、PKM2、LDHA和PCK2蛋白表达上调。结论:1、27HC抑制A549细胞的糖代谢;2、27HC通过LXR信号通路参与A549细胞的糖代谢过程。