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本研究主要是从新疆南山水西沟牧民家庭的酸马奶中分离出25株酵母菌，并对25株酵母菌进行形态学特征观察，生理生化，糖发酵试验及5.8S rDNA分子生物学鉴定酵母菌得出：Kazachstania unispora10株、Kluyveromyces marxianus7株、Kluyveromyces lactis4株、Saccharomyces cerevisiae1株、Galactomycesgeotrichum1株、菌株27疑似新种。鉴定结果对我们进一步认识并利用传统发酵乳制品中酵母菌资源具有重要意义。通过含X-gal的筛选板在6株酵母菌筛选出了2株产β-半乳糖苷酶的2种菌株：K.lactis与K.marxianus，分别命名为K.lactis-ZJ14，K.marxianus-ZJ19。经过复筛后K.lactis-ZJ14表现出良好的产乳糖酶性能。为提高K.lactis-ZJ14产酶性能，对K.lactis-ZJ14产酶条件进行单因素优化试验，结果显示培养条件为：温度30℃、pH7.0、接种量4%、培养时间18h。为了进一步提高菌株K.lactis-ZJ14产酶性能，对K.lactis-ZJ14产酶培养基优化，通过采用单因素试验、PB试验、Box-Behnken试验设计得出：K.lactis-ZJ14最佳液态发酵培养基组分为乳糖15.74g/L、酵母膏10.31g/L、硫酸镁4.84g/L、磷酸二氢钾5.42g/L。此最佳培养条件下最大酶活性为56.76U/mL。为能更好的利用和保存该乳糖酶，对K.lactis-ZJ14粗酶液性质进行了研究，结果表明：该乳糖酶具有较高的低温稳定性，粗酶液在4℃条件下保存30d后，酶活力是原酶活性的80%以上；该乳糖酶在35~45℃范围内活力较高，最适反应温度35℃；此酶在温度在20~55℃下具有耐受性，酶在20~45℃范围内处理2h后，残留酶活均在90%以上，在55℃下处理2h其残留酶活为71%；该粗酶液在pH6.0~8.0范围内活力较高，其最适反应pH7.0，在pH6.0~8.0范围内乳糖酶具有耐受性，在pH为7.0是耐受性最高。