芝麻茎点枯病是由菜豆壳球孢（Macrophomina phaseolina）引起的真菌性土传病害,对芝麻的产量和质量造成了严重威胁。因此,挖掘抗病基因,选育和种植抗病品种,对保证芝麻高产稳产具有十分重要的意义。本研究用不同地区的44个芝麻品种进行田间芝麻茎点枯病的抗性鉴定。借助转录组测序结果挑选出两个抗芝麻茎点枯病相关基因SiPYL4、SiTLP,对SiPYL4、SiTLP进行了克隆,利用Gateway技术构建了植物过表达载体,对拟南芥进行遗传转化,并对转基因植株进行了抗病性鉴定,主要得到以下结果:1、对不同地区的44个芝麻品种进行了田间芝麻对茎点枯病的抗性鉴定,鉴定结果表明,没有高抗和免疫品种,中抗（MR）芝麻种质资源为26份,占供试种质的59.1%;中感（MS）芝麻种质资源共14份,占供试种质的31.82%;高感（HS）芝麻种质资源2份,占供试种质4.55%。2、利用同源克隆技术克隆出SiPYL4、SiTLP基因。SiPYL4全长645bp,编码215个氨基酸,SiTLP全长681bp,编码227个氨基酸。3、对抗感芝麻品种进行菜豆壳球孢胁迫处理后,进行荧光定量分析,结果SiPYL4在抗病品种郑芝13中出现上调表达,在36 h时表达量较高,在感病品种冀9014中72h也出现了上调表达。SiTLP基因在抗、感品种中胁迫处理12h时同时出现表达量明显上升的情况,在感病品种冀9014中24h时表达量出现最高峰。随着胁迫时间的延长SOD、POD、CAT、H₂O₂含量也随之增加。4、超表达SiPYL4、SiTLP的转基因拟南芥与野生型相比有着较高的生长活性。菜豆壳球孢胁迫7天后野生型拟南芥感病症状明显,严重的整株枯死,转基因拟南芥只有底部莲座叶片有轻微枯黄。转基因拟南芥的活性氧清除能力也明显强于野生型拟南芥,因此推测SiPYL4、SiTLP基因在拟南芥抗菜豆壳球孢侵染过程中起关键作用。