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目的:1.探讨白介素22(Iterleukin-22,IL-22)、白介素17(Iterleukin-17,IL-17)在重症肌无力(myasthenia gravis,MG)中的表达及其与抗乙酰胆碱受体抗体(acetylcholin receptors antibody,AChR-Ab)之间的关系。2.探讨IL-22与IL-17之间的关系。 方法:1.收集30例血清AChR抗体阳性的MG患者及30例健康人静脉血样,其中MG患者中眼肌型(ocular MG)18例,全身型MG(genaralized MG)12例。2.提取所有MG患者与健康人血清样本,保存于-80℃冰箱。3.提取30例MG患者和30例健康人外周静脉血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中总RNA,保存于-80℃冰箱,采用qRT-PCR技术检测单核细胞中IL-17 mRNA与IL-22 mRNA的表达水平。4.ELISA技术检测MG组与对照组血清中IL-17、IL-22的蛋白水平。5.间接ELISA技术检测MG患者相应的血清抗AChR-IgG水平。6.从转录和蛋白水平分析IL-17、IL-22与AChR-Ab水平之间的相关性;从转录和蛋白水平分析IL-17与IL-22之间的相关性。7.采用不同浓度的重组人白介素22(recombinant human IL-22,rhIL-22)体外刺激全身型MG患者提取的PBMC,并检测其产生的IL-17水平的变化。 结果:1.MG组IL-17与抗AChR抗体水平高于正常对照组(19.31±5.11 pg/ml VS4.73±1.96 pg/ml P<0.001;0.63±0.08 pg/ml VS0.15±0.07 pg/ml P<0.001),其中全身型MG患者IL-17与抗AChR抗体水平高于眼肌型患者(24.11±3.78 pg/ml VS16.11±2.84 pg/ml P<0.001;0.67±0.07 pg/ml VS0.61±0.08 pg/ml P<0.01)。MG患者IL-22水平较对照组显著下降(19.63±4.59 pg/ml VS41.95±6.50 pg/ml P<0.001),其中全身型MG患者中IL-22水平较眼肌型患者更低(15.15±2.04 pg/ml VS22.08±3.59 pg/ml)(P<0.001.)。 2.MG组IL-17mRNA表达水平高于正常对照组(P<0.001),其中全身型MG患者IL-17mRNA的表达高于眼肌型MG患者(P<0.01)。而MG组IL-22 mRNA表达水平低于正常对照组,其中全身型MG患者IL-22 mRNA的表达较眼肌型MG患者更低(P<0.001)。 3.MG组患者外周血单核细胞中IL-17mRNA的表达水平与抗AChR抗体水平呈显著正相关性,相关系数为0.536(P<0.01),其中眼肌型、全身型MG患者外周血单核细胞中IL-17mRNA的水平与抗AChR抗体水平的相关系数分别为0.551(P<0.05)与0.619(P<0.05); MG组患者外周血单核细胞中IL-22mRNA的表达水平与抗AChR抗体水平呈显著负相关性,相关系数为-0.566(P<0.01),其中眼肌型、全身型MG患者外周血单核细胞中IL-22mRNA的水平与抗AChR抗体水平均呈显著负相关性,相关系数分别为-0.549,-0.583(P<0.05)。 4.30例MG组患者血清中IL-17的表达水平与抗AChR抗体水平呈显著正相关性,相关系数为0.538(P<0.01),其中眼肌型、全身型MG患者血清中IL-17的水平与抗AChR抗体水平均呈正相关性,其相关系数分别为0.510,0.589(P<0.05);MG组患者血清中IL-22的表达水平与抗AChR抗体水平呈显著负相关性,相关系数为-0.572(P<0.001),其中眼肌型、全身型MG患者血清中IL-22的表达水平与抗AChR抗体水平均为显著负相关性,相关系数分别为-0.582,-0.629(P<0.05)。 5.MG组患者外周血单核细胞中IL-17mRNA的表达水平与IL-22mRNA的表达水平呈显著负相关性,其相关系数为-0.884(P<0.001),其中眼肌型、全身型MG患者外周血单核细胞中IL-17mRNA表达水平与IL-22mRNA的表达水平均呈显著负相关性,其相关系数分别为-0.668(P<0.01),-0.613(P<0.05); MG组患者血清中IL-17的表达水平与IL-22的表达水平呈显著负相关性,其相关系数为-0.805(P<0.001),其中眼肌型、全身型MG患者血清中IL-17水平与IL-22水平均呈显著负相关性,其相关系数分别为-0.499(P<0.05),-0.720(P<0.01)。 6.用不同浓度的rhIL-22刺激全身型MG患者外周血单核细胞96h后,上清液中IL-17的表达量是下降的,且随rhIL-22浓度的升高IL-17的表达下降越明显,而正常对照组只有在大剂量的rhIL-22(10ng/ml)条件下,才能对单核细胞产生的IL-17有轻微的抑制作用。 结论:1.IL-22在MG中的表达降低,包括转录水平及蛋白水平,且与抗AChR-Ab水平呈负相关性,可能为MG发病中的一种保护性细胞因子。2.IL-17在MG中的表达升高,包括转录水平及蛋白水平,且与抗AChR-Ab水平呈正相关性,与以往研究结果一致,可能参与了MG的致病。3.MG患者IL-22的表达在转录水平与蛋白水平均与IL-17呈负相关。4.rhIL-22体外可以抑制全身型MG亚组患者单核细胞IL-17的产生。