蓝靛果中黄酮类化合物的提取、纯化及功能研究

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黄酮类化合物在自然界中分布广泛,主要存在于植物的叶子和果实中。由于其具有较高的生物活性,近几年来一直是人们研究的热点。蓝靛果作为一种纯天然、绿色、野生的可食用浆果,具有抗炎、降血压、抗氧化、抗癌等生理活性。据报道,蓝靛果的主要活性成分之一就是黄酮类化合物。本课题以蓝靛果为研究对象,进行了黄酮类化合物的提取、纯化及其功能性检验的研究和探讨。本课题分别采用三种不同的方法从蓝靛果中提取黄酮类化合物,通过比较确定最佳的提取方法和提取条件。通过单因素试验及正交试验设计确定了水提取法的最佳工艺条件:即提取温度为70℃,提取时间为6h,料液比为1:100;通过单因素试验及正交试验设计确定了超声波提取法的最佳工艺条件:即超声波作用时间为7min,超声波作用功率为600W,料液比为1:70;通过单因素试验及正交试验设计确定了乙醇提取法的最佳工艺条件:即提取时间为7h,提取温度为60℃,乙醇浓度为50%(v/v)。为进一步研究乙醇提取法的提取工艺,用响应面分析试验设计确定了乙醇提取法的最佳提取工艺条件:即提取时间为6.6h、提取温度为61.3℃、乙醇浓度为55.3%(v/v),在此条件下黄酮类化合物的提取量为64.94mg/g。最终确定乙醇提取法为蓝靛果黄酮类化合物的最佳提取方法,在最优条件下,提取量为64.94mg/g。采用大孔树脂的方法对蓝靛果黄酮类化合物进行纯化精制,选用AB-8大孔树脂为吸附树脂,主要研究了上样液pH值、上样流速、上样液浓度、洗脱流速、洗脱液浓度几个因素的变化对纯化效果的影响。通过试验得出最佳纯化条件:即上样液pH值为4,上样液流速为60mL/h,上样液浓度为90~120mg/mL,洗脱流速为60mL/h,洗脱液浓度为40~50%(v/v),在此条件下蓝靛果黄酮类化合物纯化后纯度可达65%以上。用纯化后的蓝靛果黄酮类化合物喂养小白鼠,分别测定小白鼠血清中胆固醇、甘油三脂和高密度脂蛋白胆固醇含量,进行降血脂功能验证。结果表明,蓝靛果黄酮类化合物可以降低胆固醇和甘油三脂含量,提高高密度脂蛋白胆固醇含量,说明蓝靛果黄酮类化合物具有降血脂功效。另外,用纯化后的蓝靛果黄酮类化合物喂养小白鼠,分别测定小白鼠游泳时间、肝糖元和肌糖元含量进行抗疲劳功能验证。结果表明:蓝靛果黄酮类化合物可以延长小白鼠游泳时间,增加肝糖元和肌糖元储备,说明蓝靛果黄酮类化合物有抗疲劳功效。
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