基于挥发性成分的术属植物化学亲缘关系研究

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苍术属(Atractylodes)是De Candolle于1838年创建的菊科的一个属,我国有5种,1变种和1亚种,分别为为茅苍术A.Lancea、白术A.Macrocephala、鄂西苍术A.Carlinoides、关苍术A.Japonica、朝鲜苍术A.Coreana、北苍术A.Chinensis和罗田苍术A.Lancea subsp.luotianensis。术属自建立以来,国内外许多学者从形态学、分子学以及化学等方面对术属植物的亲缘关系进行了大量研究,但种和种下阶元的分类一直存在着争议,尤其表现在茅苍术与北苍术的亲缘关系上,且前人在对术属植物化学亲缘关系研究时没有包含术属植物的所有类群。本论文收集了术属植物的所有类群,同时测定了茅苍术与北苍术中茅术醇、β-桉叶醇、苍术酮以及苍术素的含量,比较了茅苍术与北苍术4种成分的差异;采用气相色谱质谱联用技术系统分析了术属植物挥发性成分;综合运用指纹图谱相似度评价等化学模式识别方法探讨术属植物挥发油成分的化学亲缘关系,为术属植物的分类提供依据。主要研究内容和结论如下:  1、苍术中4种挥发性成分同时定量分析。采用气相色谱法同时测定了不同产地茅苍术与北苍术中苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素的含量,并采用雷达图对茅苍术与北苍术4种成分含量进行分析。结果显示道地茅苍术中苍术酮与苍术素含量明显高于茅术醇与β-桉叶醇含量,苍术酮和苍术素的平均含量分别为18.561 mg/g和11.655 mg/g,茅术醇与β-桉叶醇的平均含量分别为5.332 mg/g和5.165 mg/g;非道地茅苍术中茅术醇与β-桉叶醇含量明显高于苍术酮与苍术素含量,茅术醇和β-桉叶醇的平均含量分别为28.012 mg/g和23.765 mg/g,苍术酮与苍术素的平均含量分别为1.026 mg/g和2.276 mg/g;北苍术中4种成分含量变化较大,没有明显规律,苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素的平均含量分别为4.422mg/g、7.214 mg/g、9.898 mg/和5.447 mg/g。道地茅苍术、非道地茅苍术和北苍术中苍术酮加苍术素含量与茅术醇加β-桉叶醇含量的比值分别为2.22~3.76、0.04加.11和0.16~1.41。道地茅苍术4种成分具有一定的配比关系,即苍术酮∶茅术醇∶β-桉叶醇∶苍术素为(1.46~1.81)∶(0.37~0.58)∶(0.37~0.52)∶1。  2、苍术挥发油成分指纹图谱研究。采用气相色谱-质谱技术建立苍术挥发油指纹图谱,并以33批药材的共有成分为依据,对其进行聚类分析和主成分分析。结果表明:茅苍术与北苍术中共检识出15个共有成分。相似度分析结果显示道地茅苍术的相似度极高,为97.2~98.3%;非道地茅苍术与对照指纹图谱的相似度为74.2%~82.6%;北苍术与对照指纹图谱的相似度为87.6%~91.5%。聚类分析与主成分分析表明苍术可以分为3类,5批道地茅苍术聚为一类,15批来自内蒙古、辽宁、河北等地的北苍术聚为一类,13批来自安徽、湖北、河南等地的非道地茅苍术聚为一类。  3、术属植物挥发油成分的气相色谱-质谱分析。采用气相色谱-质谱技术系统分析了术属植物的挥发油成分。结果表明:道地茅苍术中鉴定出52种成分,共有成分38种,相对含量较高的成分为苍术酮、苍术素、β-桉叶醇、茅术醇、马兜铃酮、β-人参烯;非道地茅苍术中共鉴定出55种成分,共有成分24种,相对含量较高的成分为:茅术醇、β-桉叶醇、苍术素、重喷鼻醇、榄香醇、α-桉叶醇;北苍术中共鉴定出49种成分,共有成分有30种,相对含量较高的成分为:β-桉叶醇、茅术醇、苍术素、苍术酮、榄香醇、α-桉油醇;朝鲜苍术中共鉴定出51种成分,共有成分33种,相对含量较高的成分为:苍术素、苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇、[1,1-Biphenyl]-4-carboxaldehyde、榄香醇;白术中鉴定出45种成分,共有成分30种,相对含量较高的成分为苍术酮、β-桉叶烯、β-桉叶醇、茅术醇、4,5-脱氢-异长叶烯、马兜铃酮,不含苍术素;关苍术中共鉴定出54种成分,共有成分30种,相对含量较高的成分为苍术酮、β-桉叶醇、马兜铃酮、茅术醇、β-桉叶烯、β-人参烯,不含苍术素;鄂西苍术中鉴定出44种成分,相对含量较高的成分为:马兜铃酮、β-桉叶醇、苍术酮、Hedycaryol、β-人参烯、γ-榄香烯;罗田苍术中鉴定出45种成分,相对含量较高的成分为:β-桉叶醇、茅术醇、重喷鼻醇、胡萝卜醇、姜烯、α-桉叶醇。  4、术属植物挥发油气相色谱-质谱指纹图谱及化学亲缘关系研究。采用气相色谱-质谱技术对不同居群术属样品的挥发油成分进行了指纹图谱研究,运用主成分分析法、聚类分析法和判别分析法对术属植物进行分类。结果表明:术属植物中共检识出10个共有成分。相似度结果表明茅苍术、罗田苍术、北苍术、朝鲜苍术、关苍术、白术和鄂西苍术7种植物与对照指纹图谱的平均相似度分别为93.4%、92.6%、83.6%、81.1%、74.2%、71.9%和48.9%。主成分分析、聚类分析、以及判别分析结果显示术属植物可分为四类:鄂西苍术单独聚为一类;茅苍术与罗田苍术聚为一类;白术与关苍术聚为一类;朝鲜苍术与北苍术聚为一类。术属植物挥发油成分的化学亲缘关系为:罗田苍术与茅苍术亲缘关系较近;白术与关苍术亲缘关系较近;北苍术与朝鲜苍术亲缘关系较近;茅苍术与北苍术亲缘关系较远;鄂西苍术与属内其它植物亲缘关系较远。
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