肝大部分切除术后小鼠血浆蛋白质组变化的初步研究

来源 :中国人民解放军军医进修学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:same66
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研究目的:运用蛋白质组学的方法对肝脏大部分切除术后小鼠的血浆进行研究,观察肝脏再生过程中血浆蛋白质组学的动态变化,对那些在再生过程中新增、丢失或浓度变化的蛋白质进行鉴定,以期寻找肝脏再生过程中重要的相关蛋白,为进一步研究肝脏再生机制奠定基础。 方法:以肝大部切除术制备小鼠肝脏再生模型。术后4个时间点(12h、24h、48h、72h)分别设立肝大部切除术组和假手术组,抽取血液,分离血浆,并对肝脏再生组织进行组织学观察。对血浆样品去除白蛋白后,行双向凝胶电泳,所得胶图经银染后以ImagemasterTM2D Platinum软件分析。发现的差异表达蛋白点,行胶内消化,MOLDI-TOF-MS质谱仪鉴定,数据库搜索确定差异蛋白的性质。 结果:经分析发现有2个蛋白点在12h和24h切肝组恒定出现,而在假手术组中缺如;有2个点在切肝后12h和24h组表达上调;有1个点在切肝后12h、24h及48h组均表达上调。对这些蛋白点进行胶内消化、质谱鉴定、蛋白质数据库搜索,发现3个表达上调的蛋白点是延胡索酰乙酰乙酸水解酶和两个转铁蛋白片段。 结论:1.经血浆2-DE凝胶分析发现,肝大部切除术后小鼠血浆蛋白质组变化趋势呈现单峰式曲线,变化高峰在12h和24h,至48h和72h变化趋于平缓;2.凝胶分析发现血浆蛋白质组变化集中在肝大部切除术早期;3.鉴定所得的延胡索酰乙酰乙酸水解酶和两个转铁蛋白片段有可能成为今后肝脏再生研究中的重要蛋白;4.本实验建立的小鼠肝脏再生的血浆蛋白质组学研究平台可用于其他肝脏再生的相关疾病的研究。
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