目的:FB006是一个含有34个氨基酸残基的肽,从理论上讲,采用固相片段缩合法合成会更优于固相逐步合成法。本课题即在原有的固相逐步合成方法的基础上,系统研究FB006的固相片段缩合制备方法。方法:参考国内外固相片段合成的相关研究成果,初步设计出方案Ⅰ,即选择4个切点位置,将FB006分成5个片段。应用固相逐步合成方法制备FB006的全保护多肽片段中间体,再应用固相片段连接方法合成FB006。利用反相高效液相色谱(HPLC)法和质谱(LC/MS)法对全保护肽中间体和FB006粗肽进行分析鉴定。根据方案Ⅰ的实验结果再对切点位置进行优化研究。结果:采用原有固相逐步合成方法,顺利合成出5个纯度大于80%的全保护多肽片段。片段之间缩合结果显示有两个切点存在消旋问题。优化设计出切点方案Ⅱ,即取消存在消旋问题的切点,保留另外两个切点,将FB006分成3个片段。采用固相逐步合成方法,顺利合成出3个纯度大于80%的全保护多肽片段。片段之间缩合结果显示其中1个切点存在消旋问题。再次优化设计出方案Ⅲ,即只保留一个切点,将FB006分成2个片段。结果片段顺利合成,片段间缩合反应基本完全。结论:本实验确定出目前最佳的FB006固相片段合成方法:将FB006分成两个片段PDⅢ-(2即羧基端20个氨基酸残基)和PDⅢ-1;合成片段采用HBTU/HOBt/DIEA反应体系,5倍量的氨基酸,反应时间1小时,全保护肽的裂解采用30%的TFE/DCM体系;片段之间缩合采用DIC/HOBt/DMSO反应体系,反应摩尔比为PDⅢ-1: PDⅢ-2=2:1,缩合试剂过量,反应时间48小时。