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新疆调和茶是保健茶类的一种,已有1600多年的历史传承,2014年被列入新疆自治区级非物质文化遗产。本试验以印度豆蔻、红花、玫瑰花、丁香、薄荷、小茴香、甘草、干姜、姜黄、茯砖茶配制成调和茶,测定其基本理化指标,以GC-MS对香气成分进行分析,以多酚含量为加工工艺指标,利用Box-Behnken法优化加工工艺,以Fe3+还原能力、ABTS+自由基清除能力、DPPH·自由基清除能力和对H2O2氧化损伤HepG2细胞的保护作用来考察抗氧化活性,以RAW264.7巨噬细胞作为探讨基础,研究免疫活性调节能力。具体结果如下:
(1)调和茶多酚类化合物5.92%,总糖7.92%,粗脂肪6.29%,粗蛋白16.381%,氨基酸12.67%,粗纤维20.97%,灰分8.45%,水分11.14%,水浸出物23.47%。实验总共检测了17种氨基酸,必需氨基酸占总氨基酸含量的36.84%;对氨基酸进行评价,甲硫氨酸+胱氨酸含量为推荐值的30.35%,是第一限制性氨基酸。GC-MS香气分析结果表明,共检出72种香气成分,酚类41.91%,醇类11.48%,碳氢化合物8.87%,酮类8.4%,酯类3.37%,酸类2.04%,醛类0.7%。
(2)调和茶的最优工艺为提取时间24min、提取温度85.5℃、料液比1:54(g/g)。以没食子酸为标准品,在最优工艺下获得的实际多酚提取量为46.86±0.814mg/g,p=0.1723与预测值无显著性差异。以调和茶混合粉末为计量单位,测得其具有较好的还原能力,ABTS+、DPPH·自由基清除作用的IC50分别为:30.837、13.399mg/mL,以调和茶水提物的冻干物为计量单位,测得低浓度的水提物样品对HepG2细胞损伤不显著且氧化损伤保护作用也不显著,中高浓度的水提物样品对HepG2细胞没有显著损伤且氧化损伤保护作用显著,说明调和茶具有较好的抗氧化活性。
(3)实验结果显示较低浓度的调和茶对巨噬细胞RAW264.7存活率影响不显著,对NO的释放量影响显著,且提高细胞中iNOS、COX-2、TNF-α、IL-1β的分泌水平,对p-ERK、p-p38、p-JNK、p65、c-Jun、c-Fos等蛋白的表达有较高影响。通过实验,初步验证了调和茶具有增强巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用功能。
(1)调和茶多酚类化合物5.92%,总糖7.92%,粗脂肪6.29%,粗蛋白16.381%,氨基酸12.67%,粗纤维20.97%,灰分8.45%,水分11.14%,水浸出物23.47%。实验总共检测了17种氨基酸,必需氨基酸占总氨基酸含量的36.84%;对氨基酸进行评价,甲硫氨酸+胱氨酸含量为推荐值的30.35%,是第一限制性氨基酸。GC-MS香气分析结果表明,共检出72种香气成分,酚类41.91%,醇类11.48%,碳氢化合物8.87%,酮类8.4%,酯类3.37%,酸类2.04%,醛类0.7%。
(2)调和茶的最优工艺为提取时间24min、提取温度85.5℃、料液比1:54(g/g)。以没食子酸为标准品,在最优工艺下获得的实际多酚提取量为46.86±0.814mg/g,p=0.1723与预测值无显著性差异。以调和茶混合粉末为计量单位,测得其具有较好的还原能力,ABTS+、DPPH·自由基清除作用的IC50分别为:30.837、13.399mg/mL,以调和茶水提物的冻干物为计量单位,测得低浓度的水提物样品对HepG2细胞损伤不显著且氧化损伤保护作用也不显著,中高浓度的水提物样品对HepG2细胞没有显著损伤且氧化损伤保护作用显著,说明调和茶具有较好的抗氧化活性。
(3)实验结果显示较低浓度的调和茶对巨噬细胞RAW264.7存活率影响不显著,对NO的释放量影响显著,且提高细胞中iNOS、COX-2、TNF-α、IL-1β的分泌水平,对p-ERK、p-p38、p-JNK、p65、c-Jun、c-Fos等蛋白的表达有较高影响。通过实验,初步验证了调和茶具有增强巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用功能。