妊娠期及哺乳期对羟基苯甲酸丙酯暴露对子代小鼠生殖系统的影响及其机制研究

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目的探讨亲代妊娠期及哺乳期暴露于对羟基苯甲酸丙酯(PrPB)对子代生殖健康的影响。方法选择育龄期C57BL/6j雌性孕鼠,利用饲喂法使孕鼠暴露于对羟基苯甲酸丙酯,暴露期限为妊娠期第1天至哺乳期结束。根据饲料中PrPB剂量不同,分为空白对照组,低剂量组和高剂量组,剂量分别为0mg/kg,600mg/kg,3000mg/kg。以孕鼠所产子代小鼠为观察对象,通过计算性别比例、脏器系数,监测毛发质量、体重,评价PrPB暴露对仔鼠一般健康状况的影响。通过HE染色卵巢石蜡切片计数卵巢卵泡,监测性成熟期动情周期,检测血清性激素水平,评价雌性子代卵巢功能。通过免疫组织化学方法分析卵巢组织切片中硝基酪氨酸(nitrotyrosine,NTY)和4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)的表达情况,探索PrPB影响卵巢功能的可能机制。通过计数精子运动能力、畸形率、死亡率,检测血清睾酮含量,评价雄性子代生殖功能。结果(1)PrPB暴露可能影响仔鼠性别。三组实验组单只孕鼠产仔数无明显差异,但其雌雄比例有所改变,随暴露剂量升高呈现上升趋势;(2)PrPB一定时间内影响仔鼠一般生长发育情况,离乳后各组之间差异不明显。比较出生体重,低剂量组雌性子代相较于对照组有所下降,高剂量组雄性子代相较于对照组有所升高;离乳时,与对照组相比,暴露组雄性子代体重随暴露剂量升高呈现上升趋势,雌性无统计学差异;离乳后至性成熟期,暴露组子代体重相较于对照组同性别鼠均无明显统计学差异;性成熟期脏器系数,三组之间同性别子代均无明显统计学差异。(3)PrPB暴露对雌性仔鼠生殖健康产生影响。1周龄雌性子代卵巢中各级卵泡数及总卵泡数,三组之间无明显差异;性成熟期12周龄子宫与卵巢系数,卵巢中各级卵泡数、总卵泡数,三组之间也无明显差异,高剂量组血清孕激素升高。(4)PrPB暴露对雄性仔鼠生殖健康产生影响。精子计数显示精子畸形率、死亡率随暴露剂量升高而升高,精子活动率呈降低趋势但无统计学差异,暴露组血清睾酮水平与对照组统计学差异均不明显。(5)免疫组化实验显示,子代卵巢氧化应激水平升高。结论母鼠在妊娠期及哺乳期阶段暴露于一定剂量的对羟基苯甲酸丙酯,所产子代小鼠,无论雌性或者雄性,其生殖健康均会受到不同程度的影响。探索提示其可能通过影响氧化应激水平进而影响雌性仔鼠的卵巢功能。
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