【摘 要】
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目的:通过研究性别决定区域Y盒蛋白5(Sex determining region Y-box protein 5,SOX5)在口腔鳞状细胞癌(Oral Squamous Cell Carcinoma,OSCC)组织中的表达及体外研究其在OSCC细胞株CAL27侵袭和转移中的作用,以期探索OSCC的新靶点,为OSCC的诊断和治疗提供理论依据。方法:免疫组织化学Envision两步法用于检测OSCC
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目的:通过研究性别决定区域Y盒蛋白5(Sex determining region Y-box protein 5,SOX5)在口腔鳞状细胞癌(Oral Squamous Cell Carcinoma,OSCC)组织中的表达及体外研究其在OSCC细胞株CAL27侵袭和转移中的作用,以期探索OSCC的新靶点,为OSCC的诊断和治疗提供理论依据。方法:免疫组织化学Envision两步法用于检测OSCC组织及邻近癌旁非肿瘤组织中SOX5的表达情况,并利用已收集的患者临床病理资料分析其与SOX5在OSCC组织中的表达水平之间的关系。培养人正常口腔黏膜细胞株HOK,OSCC细胞株CAL27、SCC9、SCC15、SCC25,并通过Western blot明确SOX5在以上5种细胞株中的表达情况,并根据实验结果选定CAL27作为后期研究用细胞。根据转染情况将CAL27分为Si-NC组与Si-SOX5组,采用q RT-PCR及Western Blot法以明确干扰效率,采用平板克隆、划痕和Transwell实验检测下调SOX5表达后对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:1.SOX5在OSCC组织中的表达显著高于癌旁组织(P<0.01),与淋巴结转移有关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤浸润深度、TNM分期、肿瘤分化程度无关(P>0.05)。2.Western blot显示与HOK相比较,SOX5在OSCC细胞株CAL27、SCC9、SCC15、SCC25中均为高表达。3.Si RNA干扰处理CAL27后Si-SOX5组的m RNA及蛋白的表达量明显低于Si-NC组。4.在平板克隆形成实验中,与Si-NC组相比,Si-SOX5组的CAL27细胞集落克隆形成数明显延缓且减少(P<0.01)。5.划痕实验结果显示在24h时Si-SOX5组比Si-NC组划痕愈合速率减缓即迁移能力受到抑制(P<0.05),而至48h Si-SOX5组细胞较Si-NC组其迁移能力受抑制更为明显(P<0.01)。6.Transwell法迁移实验亦表明Si-SOX5组CAL27的迁移明显受到抑制(P<0.01),侵袭实验表明Si-SOX5组细胞的侵袭能力显著低于Si-NC组(P<0.01)。结论:SOX5在OSCC组织及OSCC细胞株CAL27、SCC9、SCC15及SCC25中均为高表达。SOX5表达水平与OSCC的淋巴结转移相关。在m RNA及蛋白水平测定干扰效率的结果显示干扰SOX5可显著抑制CAL27中SOX5的表达,干扰SOX5可抑制CAL27细胞的增殖、细胞迁移及侵袭能力。
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