失血性休克是临床常见的危重症之一，肺往往是最先受累的器官。失血性休克并发急性肺损伤（acute lung injury，ALI）的死亡率达40%。内毒素移位、细胞因子合成释放、中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophils，PMN）激活等环节可能在失血性休克所致组织损伤中发挥重要作用。肺内炎症反应失控和缺血/再灌注损伤是构成创伤失血性休克后ALI的主要机制。白细胞尤其是中性粒细胞（PMN）既是引发全身炎症反应综合征的主要细胞又是缺血/再灌注损伤主要参与者，成为介导休克后肺损伤的主要效应细胞。如何早期抑制PMN的趋化、黏附，减少其氧自由基、蛋白酶和溶酶体酶的产生，减轻机体炎症反应，从而预防ALI的发生显得尤为重要。 乌司他丁（Ulinastatin，UTI）是一种来源于人体的高效广谱的水解酶抑制剂，对胰蛋白酶、纤溶酶、中性粒细胞弹性蛋白酶具有较强的抑制作用。UTI本身来源于人体，无免疫原性，安全性高，应是一种较理想的外源性蛋白酶抑制剂。UTI被广泛用于急性胰腺炎的治疗，近年来其脏器保护作用成为研究热点。既往研究显示UTI对内毒素等因素所致ALI有保护作用，但此类研究大多集中于感染性休克等模型，有关UTI对失血性休克所致肺损伤的作用研究较少。 本研究采用失血性休克模型，通过测定肺组织超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、血红素氧化酶-1 （heme oxygenase-1，HO-1）和肺叶湿/干重比（wet to dry weight ratio，W/D），并观察肺组织病理学改变，探讨UTI在失血性休克所致肺损伤的保护作用。 材料和方法: 1、动物与分组： 成年雄性SD大鼠24只，SPF级，体重350～450g，由广东省医学实验动物中心提供。随机分为3组：假手术对照组（C组）、失血性休克组（H组）和乌司他丁治疗组（U组），每组8只。 2、动物模型建立及复苏： 3%戊巴比妥钠50 mg/kg腹腔注射麻醉成功后，行左侧股动、静脉插管术，分别用于有创动脉压监测和补液。C组仅行上述操作，全程旷置作为基础水平对照。另两组上述操作完成后观察10min，待循环稳定后经股动脉匀速放血，10 min内使平均动脉压（mean arterial blood pressure，MAP）降至40±5mmHg，并间断回输或放血维持此血压。U组在休克维持60min时经股静脉注射UTI 50000 U/kg（溶于生理盐水）；H组则注射等量生理盐水。休克维持60 min后完成失血性休克模型制作，随后回输全部失血及等量的乳酸林格液进行复苏，所有液体均于30min内输完。复苏后4h快速放血处死动物，取左肺切成直径约1cm小块投入液氮中，再转移至-80℃冰箱冻存备检。 3、观察指标： 3．1 肺组织SOD活力和MDA含量测定。SOD活力采用黄嘌呤氧化酶法测定，MDA含量采用硫代巴比妥酸法测定。试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供，测定方法按试剂盒说明书操作。 3．2 肺组织HO-1的测定采用Western-blot法测定。用HO-1蛋白带的灰度峰值与对应的β-actin灰度峰值之比代表HO-1的表达量。 3．3 肺组织W/D比值测定取右肺上叶，滤纸吸干肺表面水分，精确称重后放入烤箱72 h（60℃），测定W/D比值。 3．4 肺组织病理学检查取右肺中叶，4%多聚甲醛浸泡固定，常规石蜡包埋切片，HE染色，光学显微镜（Olympus公司，×200）观察肺组织病理学改变。 4、统计学处理： 采用SPSS13．0统计软件进行处理，所有计量资料以均数士标准差（x±s）表示。先行方差齐性检验，采用完全随机设计的方差分析或Welch法检验，多重比较采用LSD法或Dunnetts T3法，P<0．05为差异有统计学意义。 结果： 1、一般情况：三组动物体重及基础MAP差异无统计学意义（P=0．730； P=0．859）。 H组和U组放血量差异无统计学意义（P=0．850）。 2、肺组织SOD活力及MDA含量： 各组SOD活力比较有统计学差异（P=0．000）；H组和U组SOD活力较C组显著降低（P=0．000； P=0．000），但U组显著高于H组（P=0．003）。 各组MDA含量比较有统计学差异（P=0．000）H组和U组MDA含量较C组显著增高（P=0．000； P=0．011），而U组显著低于H组（P=0．000）。 3、肺组织HO-1表达及W/D比值： 各组HO-1表达比较有统计学差异（F=151．446，P=0．000）H组和U组HO-1表达较C组显著增高（P=0．000； P=0．000），而U组显著低于H组（P=0．000）。 各组W/D比值比较有统计学差异（F=19．223，P=0．000）H组和U组W/D比值较C组显著增高（P=0．000； P=0．002），而U组显著低于H组（P=0．016）。 4、肺组织病理学改变： C组肺组织结构完整，肺间质无水肿、炎症，肺泡大小形态均匀；H组肺间质水肿、增宽，肺泡壁结构破坏，炎性细胞聚集；U组肺泡结构尚完整，炎性细胞聚集及肺间质水肿程度均较H组轻。 结论： 乌司他丁可提高SOD活力，抑制MDA产生，减少HO-1表达，降低肺组织氧化应激水平，降低肺含水量，减轻肺组织病理学改变，从而减轻失血性休克大鼠肺组织的损伤。