随着社会节奏的加快,恶性肿瘤的发病率日益上升,已经成为危害人类健康、制约经济发展的主要因素之一。对于恶性肿瘤的治疗,常用的治疗手段为手术、化疗、免疫治疗、激素治疗及靶向治疗等。基因治疗是随着DNA重组技术的成熟而兴起的一种肿瘤治疗手段,因其副作用小,治疗效果好而被广泛应用。阳离子聚合物是常用的一种基因治疗载体,虽有较高的电荷密度,能与核酸药物紧密结合,但具有转染效率低和细胞毒性大等缺点。因此,电荷反转型阳离子聚合物（CRCP）应运而生,结合肿瘤组织结构特点,p H响应阳离子聚合物、温度响应阳离子聚合物、酶响应阳离子聚合物等被广泛研究。聚多巴胺（PDA）因显示负电荷,且具有较高的粘附性、高的反应能力、低毒性和良好的生物相容性而被广泛应用到生物工程。针对肿瘤细胞较高酯酶含量的特性,本论文合成一种酯酶响应型阳离子聚合物,将其与RNA结合成纳米粒后在表面涂覆一层PDA形成RNA-CRCP-PDA纳米微球,旨在用于恶性肿瘤的基因治疗。主要研究内容与结论如下:（1）以2,6-二甲基苯酚、N-溴代琥珀酰亚胺（NBS）、偶氮二异丁腈（AIBN）等为原料制得乙酸-2,6-二溴甲基苯酯基,然后将其与N,N,N’,N’-四甲基-1,6-己二胺进行门舒特金反应得到一种酶响应型阳离子聚合物。用紫外光谱、红外光谱、核磁共振氢谱等对其结构进行表征。此外,用质谱法考察酯酶加入前后的分子量区别,结果显示在酯酶加入后,该聚合物由大分子（6-20万）降解成小分子（400以下）,说明该聚合物具有一定的酯酶响应性,具有携带治疗基因,在肿瘤部位酯酶作用时发生降解,将核酸药物释放出来,提高转染效率的潜能。（2）将合成的电荷反转型阳离子聚合物与RNA通过静电自组装形成纳米粒,分别考察N/P比、搅拌速率、温度等对其尺寸与Zeta电位的影响。得到优化后的制备条件为:N/P为30,转速为800 rpm,温度为10℃,此条件下生成分散均匀、形状规整的RNA-CRCP纳米粒,尺寸为50-65 nm左右,Zeta电位为15 m V。将RNA-CRCP纳米粒与多巴胺溶液共混,通过溶液氧化法在其表面涂覆一层PDA,生成RNA-CRCP-PDA纳米微球。分别考察多巴胺浓度、p H、溶剂等对RNA-CRCP-PDA纳米微球尺寸、Zeta电位及形貌的影响。得到优化后反应条件为c DA=0.5 mg/m L,p H为8.2,水:乙醇=1:1,此时RNA-CRCP-PDA纳米微球尺寸为100-150 nm,Zeta电位为-35 m V,扫描电镜显示该微球形状规整,分散较为均匀,满足其作为载体在人体血液中长期循环的条件。（3）用原子力显微镜观察RNA-CRCP-PDA纳米微球离心后的上清液、RNA-CRCP纳米粒与RNA-CRCP-PDA纳米微球的微相结构;凝胶阻滞电泳实验考察CRCP对于RNA的包裹及释放;MTS法考察降解前后CRCP及RNA-CRCP-PDA的细胞毒性。结果显示:上清液中多为块状的多巴胺聚合中间体及低聚物,RNA-CRCP为尺寸在40 nm-56 nm左右的微粒,RNA-CRCP-PDA为70nm-175 nm之间的规整纳米微球;CRCP对RNA有一定的包裹作用,酯酶作用一段时间后,CRCP发生电荷反转将RNA释放出来,游离的RNA增多;细胞毒性结果显示,CRCP降解后,细胞毒性明显降低;RNA-CRCP-PDA微球在较低浓度（≦250μg/m L）下具有较高的相对细胞活性（90%以上）,毒性较低,可以用于基因治疗。