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目的： 1．观察不同浓度瓦它尼丁（Vatalanib）对体外培养大鼠角膜上皮细胞的毒性作用，评价药物的眼表毒性，为动物实验提供浓度依据。 2．观察并分析3种不同浓度Vatalanib对大鼠角膜碱烧伤模型下新生血管的作用。 方法： 1．消化法原代培养大鼠角膜上皮细胞，常规细胞传代，用第2～4代细胞，传代后孵育至少24h至细胞70％融合后移入96孔板内，加入含0．1％，0．01％，0．001％，0．000l％共4个浓度Vatalanib培养液。在30min、2h、6h、24h共4个时间点时实验终止，行MTT检测，酶联免疫监测仪上测定各孔吸光度值。每浓度每时间点做5孔。 2．建立wistar大鼠角膜碱烧伤模型。60只大鼠分为5组：A组（模型对照组）12只，造模后生理盐水结膜下注射0.1ml，隔日1次，0.3%诺氟沙星眼液、复方托吡卡胺滴眼液，点眼，2/日；B1组（0.05%Vatalanib组）12只：造模后0.05%Vatalanib结膜下注射0.1ml，隔日1次，0.3%诺氟沙星眼液、复方托吡卡胺滴眼液，点眼，2/日；B2组（0.1%Vatalanib组）12只：造模后0.1%Vatalanib结膜下注射0.1ml，隔日1次，0.3%诺氟沙星眼液、复方托吡卡胺滴眼液，点眼，2/日；B3组（1%Vatalanib组）12只：造模后1%Vatalanib结膜下注射0.1ml，隔日1次，0.3%诺氟沙星眼液、复方托吡卡胺滴眼液，点眼，2/日；C组（0.1%地塞米松磷酸钠组）12只：造模后0.1%地塞米松磷酸钠注射液结膜下注射0.1ml，隔日1次，0.3%诺氟沙星眼液、复方托吡卡胺滴眼液，点眼，2/日。 3．各组每3、7、14天观察角膜新生血管长入情况，测量新生血管长度，计算新生血管面积。取大鼠角膜，行HE染色，免疫荧光染色法检测CD31表达，半定量逆转录-聚合酶链反应检测角膜组织内VEGF的表达。 结果： 1．在含有Vatalanib的培养液中体外培养大鼠角膜上皮细胞，MTT检测可见6小时内细胞死亡迅速，6小时后速度渐缓。各组比较，6小时之前各组细胞抑制率无显著差别，6小时之后，B、C、D、E各组细胞细胞抑制差距显著增大，24小时时，随药物浓度增大，细胞抑制率升高，B组（0.0001%Vatalanib培养液）细胞抑制率4.8%，C组（0.001%Vatalanib培养液）10.3%，D组（0.01%Vatalanib培养液）21.3%，E组（0.1%Vatalanib培养液）33.5%，计算IC50为70.7mg/ml（7.07%）。 2．造模第3天，A、B1、B2、B3、C组新生血管面积平均值分别为18.9、16.3、9.8、8.6、8.2mm2；造模第7天，各组均值分别为23.9、21.4、14.4、13.4、11.6mm2；造模第14天，各组均值分别为27.3、24.5、18.9、18.4、15.0mm2。统计分析表明：3天时，A组面积与各组相比差异有显著性，C组与A、B1组面积差应有显著性，与B2、B3组面积无显著差异，B1组与B2、B3组面积差异具有显著性，B2、B3组面积差异无显著性；7天时，A组面积与各组相比差异有显著性，C组与A、B1、B2组面积差应有显著性，与B3组面积无显著差异，B1、B2组与B3组面积差异具有显著性，B1、B2组面积差异无显著性；14天时，A组面积与各组相比差异有显著性，C组与A、B1、B2、B3组面积差异均有显著性，B1组与B2、B3组面积差异具有显著性，B2、B3组面积差异无显著性。 3．免疫荧光染色结果使用Image-ProPlus软件分析，3天时，A组IOD值与各组相比差异有显著性，C组与A、B1、B2组IOD值差应有显著性，与B3组无显著差异，B1、B2组与B3组差异具有显著性，B1、B2组差异无显著性；7天时，A组IOD值与余各组相比差异有显著性，C组与余各组IOD值差异均有显著性，B1、B2组与B3组差异具有显著性，B1、B2组差异无显著性；14天时，A组IOD值与余各组相比差异有显著性，C组与余各组IOD值差异均有显著性，B1、B2、B3之间差异无统计学意义。 4．半定量RT-PCR结果使用ImageJ软件分析基因扩增产物灰度值，使用内参标定，3天时，A组与各组相比差异有显著性，C组与A、B1、B2组差异有显著性，与B3组无显著差异，B1、B2、B3各组间差异均有显著性；7天时，A组与各组相比差异有显著性，C组与各组差异有统计学意义,B1与B2、B3差异具有显著性，B2和B3差异无显著性；14天时，A组与各组相比差异有显著性，C组与余各组IOD值差异均有显著性，B1和B2差异无统计意义，B1、B2与B3差异具有统计学意义。 结论： 1．MTT实验24小时时计算VatalanibIC50为70.7mg/ml（7.07%），可见Vatalanib对大鼠角膜上皮细胞是非常安全的。 2．Vatalanib对大鼠角膜新生血管生成有抑制作用，与0.1%地塞米松磷酸钠效果相比效果稍弱。药物抑制新生血管的效果具有浓度依赖性。