氨基酸靶标分析用于急性辐射损伤早期伤情分类的初步研究

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核事故后,对大量辐射暴露人群进行迅速、准确地伤情分类无论对于有限的医疗资源配置还是对大量伤员的分类、处理和早期治疗都显得至关重要。本文首先建立了高效液相色谱/电喷雾串联质谱用于大鼠体液中氨基酸分析的技术平台,然后利用该技术平台从剂量效应和时间效应两方面,考察了急性电离辐射对大鼠体液中氨基酸代谢的影响,并结合非线性偏最小二乘法(PLS)进行了伤情分类的研究。1.建立了一个基于高效液相色谱/电喷雾串联质谱(HPLC-ESI-MS/MS)与固相萃取(SPE)相结合的用于分析大鼠体液中氨基酸的方法。以硅胶基质的强阳离子交换固相萃取柱(SCX-SPE)提取体液中的氨基酸和降低基质效应,对SPE处理过程中的样品pH值进行了优化。样品pH值为2.8时,SCX-SPE提取氨基酸的回收率和重现性比较令人满意。此外,对分析方法特性进行了考察,包括精密度、准确度及标准曲线等。2.将建立的液质联用的大鼠血浆中氨基酸分析方法,从剂量效应和时间效应两方面考察了电离辐射对大鼠血浆中氨基酸代谢的影响,结合非线性PLS回归模型进行了伤情分类研究。结果表明,辐射后5h血浆氨基酸对于无辐射对照组的分类正确率为92.3%;辐射后24h,不同程度的伤情分类正确率均在83%以上,其中中度、严重伤情的分类正确率分别达到了91.7%和92.3%;辐射后72h的伤情分类效果最佳,不同程度的伤情分类正确率均达到90%以上,其中中度和极重度的分类正确率达到100%。3.将建立的液质联用的大鼠尿液中氨基酸分析方法,从剂量效应和时间效应两方面考察了电离辐射对大鼠尿液中氨基酸代谢的影响,结合非线性PLS回归模型进行了伤情分类研究。结果表明,辐射后48h和72h的分类效果优于前面时相点,不同程度辐射损伤的伤情分类正确率在70%以上,但整体分类效果不及血浆样品。
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