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【目的】探索口腔癌相关成纤维细胞分泌蛋白因子特性及对热诱导Tca8113舌鳞癌细胞凋亡的调节作用。【方法】(1)采用原代培养方法,培养口腔舌鳞癌手术切除组织及口腔正常黏膜组织成纤维细胞。纯化后应用免疫细胞化学方法鉴定口腔癌相关成纤维细胞和正常成纤维细胞。倒置显微镜及HE染色观察细胞形态。(2)取第三代口腔癌相关成纤维细胞和正常成纤维细胞常规培养72小时后,行无血清培养基继续培养24h后收获上清,行细胞因子抗体芯片检测。(3)收获第三代口腔癌相关成纤维细胞和正常成纤维细胞培养上清,制备条件培养基,按0/6、1/6、2/6、3/6、及4/6的体积比与Tca8113细胞间接共培养。24h后行Tca8113细胞存活率检测；8h后行Tca8113细胞bcl-2及bax蛋白免疫细胞化学检测；8h后43℃、80min水浴加热,继续常规培养24 h后行碘化丙啶染色流式细胞仪凋亡率检测。[结果](1)成功培养获得了口腔癌相关成纤维细胞和正常成纤维细胞。与正常成纤维细胞相比,口腔癌相关成纤维细胞生长速度较快,可见较多细胞重叠生长；矮胖梭形,核单染或多核,细胞突起明显,不规则；α-平滑肌肌动蛋白表达阳性。(2)口腔癌相关成纤维细胞和正常成纤维细胞分泌蛋白因子有显著差异,口腔癌相关成纤维细胞分泌蛋白因子分泌高于正常成纤维细胞2倍的有44种,低于2倍的的有92种。显著高于正常成纤维细胞的因子有CD40／TNFRSF(肿瘤坏死因子4.39017408倍)、IL-17C(白介素类6.55024497倍)、MFRP(其他因子16.70024954)、MIG(趋化因子19.22187517倍)、Smad 4(其他因子5.954984175倍)因子、显著低于正常成纤维细胞的因子有CCL28/VIC(趋化因子0.0889778倍)、GFR alpha-1(生长因子0.0754521倍)、Neuregul生长因子0.0365995倍)等。(3)成纤维细胞上清3/6体积比共培养时,对Tca8113细胞存活率有影响(P<0.05)。(4)正常成纤维细胞上清和口腔癌相关成纤维细胞上清对Tca8113细胞bax蛋白表达水平无明显影响；正常成纤维细胞上清对Tca8113细胞bcl-2蛋白表达水平无明显影响,而口腔癌相关成纤维细胞上清能明显增强Tca8113细胞bcl-2表达水平；(5)正常成纤维细胞上清对热诱导Tca8113细胞凋亡率无明显影响(P>0.05)；而口腔癌相关成纤维细胞上清在2/6体积时明显抑制热诱导Tca8113细胞凋亡的发生(P<0.05)。[结论](1)口腔舌鳞癌CAFs和正常成纤维细胞在生长特性及分泌的蛋白因子方面存在差异,个别因子的分泌表达有显著不同。(2)口腔癌相关成纤维细胞可能通过提高Tca8113舌癌细胞内bcl-2蛋白表达,降低热诱导Tca8113细胞凋亡的敏感性。