蜂胶总黄酮对小鼠病理性心肌肥大和心衰的保护作用及其机制研究

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蜂胶是蜜蜂从几种植物中收集的天然树脂产品,并混入蜂蜡、唾液酶(β-葡萄糖苷酶)而产生的一种复杂的混合物,具有悠久的历史,已被广泛用于抗炎和抗氧化,蜂胶具有广泛的生物学活性,蜂胶总黄酮(Total Flavonoids of Propolis,TFP)是蜂胶的主要活性化合物,能够发挥很强的抗氧化作用。但是,其在心血管疾病中的作用尚不清楚。本实验应用异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导C57/B6L小鼠病理性心肌肥大(PCH)的药效学模型。采用QPCR、Western blot、分光光度法、HE和Masson染色等技术检测心肌肥大、凋亡损伤、炎性因子等变化。探索蜂胶总黄酮(Total flavonoids of propolis,TFP)有效防治心肌肥大和心肌损伤的分子机理,阐明其信号传导通路,确定药物作用的分子靶点。结果表明,TFP(1-50 mg·kg-1·d-1)呈剂量依赖性抑制ISO诱导的ANF和β-MHC再活化。而且TFP 25和50 mg·kg-1·d-1剂量组的作用相当,因此选定25 mg·kg-1·d-1进行后续实验研究;TFP可降低ISO-诱导的PCH小鼠HW及HW/BW比值;TFP治疗亦可减少ISO-诱导的PCH小鼠心脏横截面积的增加,同时,与对照组比较,ISO诱导的PCH小鼠ANF m RNA水平升高;TFP对心功能亦有明显的改善作用;在ISO处理的心脏中检测到大量细胞死亡与纤维化,而TFP可以减轻ISO诱导的心肌细胞死亡和纤维化。TFP亦可减轻ISO诱导的α-SKA水平升高,但ISO和TFP对MMP-9的影响不具有统计学差异。TFP可减轻ISO诱导的PCH小鼠心肌的凋亡损伤,即Caspase-8,-9,-3活性增加,p53、TNF-R1、Fas的m RNA水平升高;且在ISO诱导的PCH小鼠中TFP可以增加p-AKT/AKT的比值;另外,加入PI3Ks抑制剂WM可以对抗TFP的抗心肌肥大作用,说明TFP可能通过PI3K/AKT信号途径发挥心肌保护作用。综上所述,TFP可减轻ISO造成的心脏功能异常、心肌肥大以及纤维化;TFP可亦对抗ISO所致的凋亡及心室重构,且与PI3K/AKT信号途径相关。
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