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慢性肾功能衰竭(chronic renal failure;CRF)是临床上常见的慢性非传染性疾病,目前该病的病因错综复杂,随着糖尿病、高血压等发病人数越来越多,CRF作为其并发症的发病率也逐年升高,现今依然没有安全有效的慢性肾功能衰竭治疗方法。CRF患者的不同阶段均会伴有各种胃肠道反应,根据中医的“肾胃相关”理论,本课题选用大黄与黄芪两味中药作为研究对象,二者均为治疗CRF的临床常用药物,在临床上发挥了很好的治疗作用,但目前尚未见从胃肠道方面的作用机制研究。本课题在对慢性肾功能衰竭中医病机的基础上,基于“肾胃相关”理论,应用现代药理学实验研究方法,建立CRF大鼠模型,首先筛选出单味大黄与黄芪治疗CRF的最佳剂量,随之采用不同的配比方案以研究不同配伍比例的大黄黄芪对模型大鼠的体重、肾脏系数、24h 尿蛋白(Proteinuria;Upr)、血肌酐(Serum creatinine;SCR)、尿素氮(Blood Urea Nitrogen;BUN)、尿酸(Uric acid;UA)、胃肠激素水平,以及肾纤维化相关因子表达水平的影响,旨在考察慢性肾功能衰竭时,体内胃肠激素水平与肾纤维化相关因子表达的相关性,以及大黄黄芪不同配伍比例治疗慢性肾功能衰竭的相关药理作用机制,并以此筛选出最佳的临床给药方案。目的:筛选出单味中药大黄与黄芪治疗慢性肾衰竭的最佳剂量,观察不同配比的大黄黄芪对CRF大鼠的疗效,分析CRF大鼠胃肠动力的改变与肾纤维化相关因子:转化生长因子 β 1(transforming growth factor β 1;TGF-β 1)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor;HGF)表达的相关性,分析大黄黄芪治疗慢性肾衰竭相关的药理作用机制以及最佳临床配比给药方案。方法:取雄性SD大鼠,5/6肾切除法制备CRF大鼠模型,模型制备成功后,除假手术组外,单味药实验将模型制备成功的大鼠按24h Upr水平分为模型组、阳性药组、大黄高、中、低剂量组和黄芪高、中、低剂量组,配比实验将模型制备成功的大鼠分为模型组、阳性药组、大黄组、黄芪组和大黄黄芪1:1、1:2、1:4、1:6组。一周后药物干预,给药5周后处死动物,收集24h尿液检测24h Upr,单味药实验中腹主动脉取血检测血清SCR、BUN、UA的水平,取部分肾组织用于HE染色,配比实验除以上步骤外,还要分离胃窦组织,检测血清及胃窦中胃动素(MTL;Motilin)、胃泌素(GAS;GAStrin)、血管活性常肽(VIP;Vasoactive intestinal peptide)、生长抑素(SS;Somatostatin)的水平,取部分残肾组织以检测肾组织中TGF-β 1、TGFβ lmRNA、HGF、C-Met(肝细胞生长因子受体;hepatocyte growth factor receptor)的表达水平。结果:1.单味药大黄、黄芪及各配比治疗后,CRF大鼠的24h Upr和血清SCR、BUN、UA水平均显著降低(P<0.01,P<0.05)。单味药大黄黄芪实验中以大黄中剂量和黄芪中剂量组的效果最为明显,配比实验以大黄黄芪1:2组疗效最好。2.配比实验中,大黄、黄芪及大黄黄芪的各配比方均能显著降低CRF大鼠的TGF-β 1表达水平,增加肾组织中C-Met表达(P<0.01,P<0.05),大黄黄芪1:2和1:4组能够显著降低CRF大鼠的TGF-β 1mRNA的浓度(P<0.01,P<0.05),大黄黄芪1:2、1:6组能够显著提高HGF的相对表达(P<0.05),具有减轻肾间质纤维化的作用。除大黄及大黄黄芪1:1组外,其他各给药组均能显著提高血清MTL浓度(P<0.01,P<0.05),大黄与大黄黄芪1:2、1:4、1:6组还能显著下调血清GAS水平(P<0.01,P<0.05),大黄及大黄黄芪各配比剂量能显著提高血清SS浓度,降低血清VIP的浓度(P<0.01),调整体内胃肠激素的水平,有助于恢复胃肠动力。3.配比实验中大黄和大黄黄芪1:4组对CRF大鼠残肾的代偿性肥大具有显著抑制作用。各治疗组可以有效保护肾小管上皮细胞结构的完整性、减轻肾小球硬化、肾小管扩张和肾间质纤维化程度,抑制肾间质中的炎性细胞和结缔组织增生。4.HGF/C-Met及体内血清SCR的表达与胃肠激素的水平无明显相关性(P>0.05);而24h尿蛋白、BUN、UA、TGF-β 1及其mRNA表达水平与体内GAS、VIP、SS的含量呈现明显的相关性(P<0.01,P<0.05),与MTL含量无明显相关(P>0.05),且其表达水平与GAS、VIP含量呈显著正相关,与SS含量呈显著负相关。各治疗组中以1:2配比使用的疗效最优。结论:单味药大黄与黄苗均能显著降低CRF大鼠的24h Upr、血清SCR、BUN、UA的水平,抑制残肾的代偿性肥大,改善残肾的病理状态,有效恢复肾功能。大黄黄芪各剂量组中,均以中剂量组的疗效最优。CRF大鼠的胃肠激素水平紊乱与TGF-β 1的因子表达水平及代谢毒素,包括24h尿蛋白、BUN、UA的水平呈现明显的相关性,而与HGF/C-Met表达水平无明显相关。大黄黄芪的不同药对能显著降低CRF大鼠的24h Upr、血清SCR、BUN、UA的水平,抑制残肾的代偿性肥大,改善残肾的病理状态,调整体内TGF-β 1/HGF表达,延缓肾间质纤维化程度,有效恢复肾功能,调节体内胃肠激素水平,有助于胃肠道功能的恢复。各治疗组中以大黄黄芪1:2组的疗效最优。