目的:1,3-β-葡聚糖是公认的职业环境中真菌暴露的生物标志物,因此以1,3-β-葡聚糖所诱导的肺部炎症模型研究真菌暴露引起的过敏性肺炎。1,3-β-葡聚糖可募集大量以中性粒细胞为主的炎性细胞聚集于肺部。自噬是机体一种重要的保护和防御机制,HMGB1可以参与调控多种细胞功能。本研究利用AAV-sh-HMGB1和特异性抑制剂EP,研究HMGB1对1,3-β-葡聚糖所诱导的肺部炎症的调控作用,以及HMGB1对中性粒细胞自噬的调控机制。方法:实验动物为健康雄性C57BL/6小鼠,按体重随机分为4组,收集的肺泡灌洗液和肺组织并提取小鼠骨髓原代中性粒细胞。H&E染色观察肺组织病理改变。ELISA和Realtime-PCR检测HMGB1和细胞因子的表达。Western blot和Realtime-PCR测定HMGB1和自噬相关蛋白及基因的表达。TUNEL法检测细胞凋亡。免疫荧光法观察蛋白的表达,透射电镜检测肺组织中自噬小体。结果:1、1,3-β-葡聚糖可诱导小鼠肺组织HMGB1分泌增加,促进HMGB1从细胞核转位至细胞质。2、AAV-sh-HMGB1能够显著降低肺组织HMGB1的表达。3、沉默HMGB1加重了1,3-β-葡聚糖诱导的肺部炎症细胞浸润。4、1,3-β-葡聚糖可诱导小鼠肺组织中炎性因子的表达。5、沉默HMGB1可减少1,3-β-葡聚糖诱导的肺组织自噬小体的数量,并显著降低1,3-β-葡聚糖诱导的自噬相关蛋白LC3,P62的表达;但沉默HMGB1并未影响自噬小体和溶酶体融合。6、1,3-β-葡聚糖可诱导小鼠BALF中的炎性细胞尤其是中性粒细胞显著增多,沉默HMGB1后进一步提升BALF中炎性细胞总数和中性粒细胞数量;HMGB1表达于肺组织的中性粒细胞上。7、EP能够显著抑制1,3-β-葡聚糖诱导的中性粒细胞HMGB1的表达。8、EP能够抑制中性粒细胞分泌NETs,而自噬能够促进NETs的释放。9、抑制HMGB1可加剧1,3-β-葡聚糖诱导的细胞凋亡水平。10、抑制HMGB1显著降低1,3-β-葡聚糖处理的中性粒细胞自噬相关蛋白水平LC3,P62表达,BECN1的表达增多。11、HMGB1与BECN1相互作用影响中性粒细胞自噬,1,3-β-葡聚糖暴露的小鼠肺组织中HMGB1与BECN1的共定位在中性粒细胞上。结论:1.HMGB1能够抑制1,3-β-葡聚糖诱导的肺部炎症的进展;2.HMGB1能够促进中性粒细胞自噬进而对1,3-β-葡聚糖所致肺部炎症发挥抑制作用;3.胞浆HMGB1通过与BECN1相结合调控1,3-β-葡聚糖诱导中性粒细胞自噬。