目的：脂氧素(lipoxinA4，LXA4)具有促炎症消退和抗炎作用，子痫前期患者血管内过度炎症反应可引起血管内皮损伤，而激活的中性粒细胞在血管内皮损伤中有着重要的作用，故中性粒细胞的凋亡极为重要，本实验就LXA4对重度子痫前期外周血中性粒细胞凋亡的影响及其机制进行了研究。 方法： 1.1中性粒细胞的分离。通过非连续梯度密度离心分离重度子痫前期患者(24例)和正常妊娠待产孕妇(24例)外周血中性粒细胞，通过台盼蓝排斥实验计数并评价细胞存活率。形态学观察中性粒细胞纯度达94％～97％。 1.2中性粒细胞的培养。将分离出的中性粒细胞悬浮于含10％(体积分数)胎牛血清的RPMI-1640培养液中，按每孔终浓度2×106细胞/mE接种于24孔平底培养板，于37℃、5％CO2培养箱中培养24小时后取细胞检测。每组设定3个平行孔。 1.3形态学分析。收集细胞，经4％多聚甲醛固定，DAPI染色，Apotome显微镜下观察细胞核形态。收集细胞，经2.5％(体积分数)戊二醛固定，1％(体积分数)锇酸后固定，树脂包埋，超薄切片，铅铀双染色，透射电镜下观察超微结构。 1.4凋亡率判断。用FICT-annexinV＼PI流式细胞法检测各组细胞凋亡率。 1.5Bax蛋白表达量的检测。用免疫细胞化学技术SP法，以PBS代替一抗，作为空白对照，并设立阴性对照组。每张细胞涂片于400倍视野下，至少观察300个细胞，以阳性细胞百分比代表Bax蛋白表达量。 2.1中性粒细胞的分离。通过非连续梯度密度离心分离重度子痫前期患者(24例)和正常妊娠待产孕妇(24例)外周血中性粒细胞，通过台盼蓝排斥实验计数并评价细胞存活率。形态学观察中性粒细胞纯度达94％～97％。 2.2中性粒细胞的培养。将分离出的中性粒细胞悬浮于含10％(体积分数)胎牛血清的RPMI-1640培养液中，按每孔终浓度2×106细胞/mL接种于24孔平底培养板，子痫前期组分为四组，培养液中分别预先加入终浓度逐渐升高的LX4A(0nmol/L，1nmol/L，10nmol/L，100nmol/L)；正常妊娠对照组分为两组，分别预先加入两种终浓度的LXA4(0nmol/L，100nmol/IL)。于37℃、5％CO2培养箱中培养24小时后取细胞检测。每组设定3个平行孔。 2.3凋亡率判断。用FICT-annexinVPI流式细胞法检测各组细胞凋亡率。 结果： 1、培养两组中性粒细胞呈现出凋亡极具特征性的形态学改变。 2、在流式细胞仪检测中，正常妊娠组和重度子痫前期组中性粒细胞凋亡率分别为(65.86±3.61)％和(48.91±3.98)％，具有显著性差异(t=10.93，P＜0.01)。 3、重度子痫前期组外周血中性粒细胞免疫化学染色显示中性粒细胞Bax蛋白表达量与凋亡率呈强正相关(r=0.886，P＜0.01)。 4、在流式细胞仪检测中，正常妊娠LXA4100nmol/L组凋亡率为(67.89±3.531％，与0nmol/L浓度组凋亡率无显著性差异(P＞0.05)。重度子痫前期组随LX4A浓度逐渐升高，凋亡率分别为(55.87±4.53)％、(62.22±2.58)％和(69.00±2.24)％，组内比较均有显著性差异(P＜0.05)。 结论： 1、重度子痫前期外周血中性粒细胞凋亡延迟。 2、体外LXA4对正常妊娠外周血中性粒细胞凋亡无影响，对重度子痫前期外周血中性粒细胞的凋亡有促进作用，重度子痫前期组随脂氧素浓度变化凋亡率逐渐增加。 3.重度子痫前期患者外周血中性粒细胞存在凋亡延迟，其机制可能与Bax蛋白表达的减少有关。