【摘 要】
:
背景:软组织缺损的修复重建是临床上目前亟待解决的问题。脱细胞脂肪基质(Acellular Adipose Matrix,AAM),因其原材料来源广泛、具有异体/异种应用潜力并能够在移植后自发诱导成脂,是未来解决软组织缺损的理想填充剂。但是,目前通过传统方式制备的脱细胞脂肪基质,内含的生物活性成分在制备过程中大量流失/破坏,移植后无法实现稳定且大范围的成脂结果。本课题组前期通过改良制备流程,以快速、
【基金项目】
:
国家自然科学基金项目(81772101,81801933);
论文部分内容阅读
背景:软组织缺损的修复重建是临床上目前亟待解决的问题。脱细胞脂肪基质(Acellular Adipose Matrix,AAM),因其原材料来源广泛、具有异体/异种应用潜力并能够在移植后自发诱导成脂,是未来解决软组织缺损的理想填充剂。但是,目前通过传统方式制备的脱细胞脂肪基质,内含的生物活性成分在制备过程中大量流失/破坏,移植后无法实现稳定且大范围的成脂结果。本课题组前期通过改良制备流程,以快速、温和的脱细胞流程研发出一种新型脱细胞脂肪基质(Mild Acellular Adipose Matrix,M-AAM),相比传统AAM产品保留更多生物活性成分并能够实现更好的体内成脂结果。然而,M-AAM内依旧残留了少量的抗原成分,因此限制了其在体内的生物学性能。研究表明,甲氧基聚乙二醇(Methoxy polyethylene glycol,mPEG)修饰产生的免疫伪装效应能够在体内及体外降低免疫排斥反应。然而,尚未有研究将AAM与免疫伪装技术相结合。目的:探究mPEG修饰的M-AAM在体内的成脂结果及再生机制。方法:采用免疫缺陷小鼠与野生型小鼠的移植对照实验以探究M-AAM内残留抗原对成脂结果影响。对比研究mPEG修饰/未修饰的M-AAM在野生型小鼠体内的成脂结果。通过调控小鼠体内调节性T(Regulatory T cell,Treg)细胞水平,探究mPEG修饰影响异种M-AAM体内成脂结果的机制。并通过体外细胞共培养实验,验证mPEG修饰、Treg细胞水平以及M2型巨噬细胞三者之间的关系。检测项目包括:组织学染色、细胞活死鉴定、酶联免疫吸附试验、免疫荧光染色、流式细胞检测、实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法。结果:1.异种M-AAM在野生型小鼠体内的体积保留及成脂结果劣于免疫缺陷型小鼠。2.mPEG修饰能够有效降低M-AAM中残余的主要组织相容性复合体Ⅰ和主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ)表达,并降低移植后宿主体循环免疫球蛋白M和免疫球蛋白G(IgM和IgG)水平。3.在野生型小鼠移植模型中,mPEG修饰的异种M-AAM相比未修饰的M-AAM,能够实现更好的体积保留以及成脂结果。4.mPEG修饰产生的免疫伪装效果能够诱导异种M-AAM移植物内Treg细胞水平上升。5.Treg细胞通过分泌细胞因子(IL-10、IL-13及TGF-β1)促进M2型巨噬细胞极化,最终促进M-AAM移植物的成脂结果。结论:1.异种M-AAM内残留的抗原成分限制了移植物在野生型小鼠体内的体积保留及脂肪再生结果。2.mPEG修饰的异种M-AAM能够在野生型小鼠体内实现优秀的体积保留以及脂肪再生结果,是未来构建永久性软组织的可靠材料。3.Treg细胞在异种M-AAM的体内再生过程中发挥重要作用。
其他文献
目的:1.评估影像引导下经皮微波消融治疗脊柱转移瘤的安全性和有效性;2.构建新西兰大白兔VX2椎体肿瘤模型,比较穿刺经验对使用导航机器人进行穿刺的影响,对使用CT引导和导航穿刺机器人引导穿刺进行比较研究;3.比较光学导航穿刺机器人辅助穿刺消融与传统CT引导穿刺消融新西兰大白兔VX2椎体肿瘤模型实验研究。资料与方法:1.回顾2016年12月至2019年12月所有脊柱转移瘤的病例,筛选出适合经皮微波消
研究背景为了促进骨折愈合,人们开始关注更灵活,刚度较小的内固定结构。对侧皮质锁定技术被设计为在保持结构强度的同时降低锁定钢板的结构刚度,针对性的改善了锁定钢板应力集中、应力遮挡以及抑制骨折愈合等问题。为对侧皮质锁定结构提供更可靠的工程力学理论基础和参考数据,并针对对侧皮质锁定结构提出客观的设计要求以及抗疲劳设计方案,对这种动态骨折内固定结构在临床应用推广有重要的意义。目的1.描述并解释对侧皮质锁定
丘脑网状核(Thalamic Reticular Nucleus,TRN),是位于丘脑-皮层环路中的主要由GABA能中间神经元组成的核团。它主要接受来自皮层和丘脑的投射,却只投射到丘脑的相关脑区。正是由于这种特殊的位置及投射特点,TRN被认为在丘脑-皮层环路的功能中发挥重要作用。这些功能包括睡眠-觉醒的调控,感觉门控,感觉信息的筛选,以及高级认知功能比如注意力等。一些严重的精神疾病都有这些功能的不
研究背景:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种与年龄相关严重的神经退行性疾病,它以脑内异常的淀粉样蛋白-β(amyloid-β,Aβ)沉积为特征,影响着全球数千万人的健康。到目前为止还没有找到切实有效的治疗方法。脑内存在多种清除Aβ的途径,如果发生Aβ清除功能障碍,最终会导致脑实质中的Aβ沉积。类淋巴系统是近年来发现的一种重要的脑内Aβ清除途径。在AD过程中类淋巴系统
第一部分背景椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IVDD)引起的颈肩腰腿痛已成为一个严重影响人们身体健康的全球性难题,目前仍缺乏长期有效的治疗手段。近年来,致力于提高椎间盘内源性修复能力的生物治疗已得到重视。髓核间充质干细胞(nucleus pulposus mesenchymal stem cells,NPMSCs)通过向类软骨细胞分化及旁分泌作用修复退
研究背景慢性肾脏病是一个世界性的公共卫生问题。糖尿病肾病是导致慢性肾脏病和终末期肾病的主要因素。据预测,到2040年,年龄在20-79岁之间的糖尿病患者将增加到6.42亿,其中30-40%将发展为糖尿病肾病。因此,任何能够延缓或者阻止糖尿病肾病发展的策略都具备极其重要的社会和经济意义。NLRP3(NOD,LRR-an-d pyrin domain-containing protein 3)是细胞内
脑出血(ICH)后继发性脑损伤是由炎症途径激活介导的。本研究旨在研究在ICH发病过程中大脑组织中差异表达的长非编码RNA(lncRNAs),并探讨其致病功能。采用胶原酶注射建立的ICH小鼠模型,获得差异表达的lncRNAs进行深度测序。用脂多糖处理小鼠小胶质细胞,建立细胞炎症模型。用定量RT-PCR检测lncRNA和miRNA的表达,用westernblot检测蛋白质表达。用酶联免疫吸附法测定小鼠
[研究背景]类风湿关节炎(Rheumatoidarthritis,RA)是一类以反复发作的滑膜炎症、关节内持续进展的骨破坏为主要病理特征的自身免疫性疾病。甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)作为一线药物,可以有效阻断部分早期RA进展至骨质破坏阶段,但其全身副作用较大,患者依从性较差,临床长期用药受限。因此,亟需找到一种有效、安全且临床应用广泛可行的治疗方案。多项研究表明,纳米载药技术通过静
谷氨酸是哺乳动物脑中最重要的兴奋性递质之一。它从细胞中持续地释放出来,然后在细胞外以再摄取的方式被清除,以保持非常低的胞外浓度从而避免对细胞产生谷氨酸兴奋性毒性。这种基本的神经功能得以实现取决于在胶质细胞和神经元质膜上表达的兴奋性氨基酸转运蛋白(excitatory amino acid transporters,EAATs)。尽管神经胶质细胞和神经元均表达EAATs,但目前认为神经胶质细胞中表达
研究背景最近,大量研究表明长链非编码RNA linc00662在多种癌症中起着致癌基因的作用。然而,linc00662在结直肠癌(colorectal cancer CRC)中确切的肿瘤发生机制尚不清楚。在GEO(Gene Expression Omnibus)数据库中,我们发现linc00662在CRC组织中高表达,而且在不可切除的结直肠癌组织中其表达量显著升高;在TCGA(The Cancer