应激诱导肉仔鸡氧化损伤的机制研究

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本试验利用三个相关试验,从整体水平(血浆)、组织水平(骨骼肌)和细胞水平(线粒体)三个水平入手,通过测定抗氧化物酶活性及抗氧化能力和蛋白质、脂肪、DNA氧化损伤状况,探讨了应激诱导雄性肉仔鸡氧化损伤的机制。试验一,通过给雄性肉仔鸡注射地塞米松磷酸钠(DSP)引起应激,研究应激诱导氧化损伤的机制。试验选取16日龄爱拔益加雄性肉仔鸡(AA)36只,随机分为三组,分别为应激组、对照组及采食量配对组。试验持续三天,应激组皮下注射DSP(2.6mg/kg BW),对照组及采食量配对组注射相同体积的生理盐水。线粒体分离自骨骼肌组织。线粒体呼吸链酶复合体活性、线粒体及肌肉组织中抗氧化物酶活性、丙二醛(MDA)含量及蛋白质羰基含量均用紫外分光光度计测定。应激组线粒体呼吸链酶复合体活性和抗氧化物酶活性均低于对照组,血浆过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及MDA和蛋白质羰基含量则偏高。试验二,通过DSP加不同饲粮水平处理,探讨应激诱导肉鸡氧化损伤机制。150只1日龄的AA雄性肉仔鸡随机分为两组,一组饲喂高能饲粮,另一组饲喂对照饲粮。14日龄时从两组各选24只鸡。16日龄时,两组下又设两个小组,其中一个小组皮下注射DSP(2.6 mg/kg BW),另一个小组注射相同体积生理盐水,试验持续3天。8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)用酶标仪测定;脂肪酸组成用气相色谱仪测定;尿囊素用液相色谱仪测定;线粒体呼吸链酶复合体活性、线粒体提取及肌肉组织中抗氧化物酶活性、MDA含量及蛋白质羰基含量均用紫外分光光度计测定。线粒体分离自骨骼肌组织。结果显示,与高能饲粮组和对照组相比,对照饲粮组和DSP组有较高水平的尿酸、尿囊素、蛋白质羰基、MDA和8-OHdG,同时有较低水平的骨骼肌多不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸/单不饱和脂肪酸以及血浆和肌肉组织抑制羟自由基能力;DSP处理能引起呼吸链酶复合体及抗氧化物酶功能紊乱,而高能饲粮能缓解这一现象。试验三,将肉鸡置于32°C环境中7天,研究热应激诱导的氧化损伤与线粒体呼吸链功能之间的关系。试验选取35日龄AA肉鸡24只,随机分为两组,分别为热应激组(32°C,7天)和对照组(24°C,7天)。线粒体由骨骼肌组织中分离。本次试验结果显示,热应激可导致线粒体呼吸链功能紊乱并改变抗氧化物酶活性;高温能显著提高机体中尿酸、尿囊素、蛋白质羰基、MDA和8-OHdG的含量,降低血浆总抗氧能力(T-AOC),并能减弱血浆及骨骼肌抑制羟自由基能力。总之,本次试验结果表明DSP处理或热应激均可引起肉鸡机体氧化系统和抗氧化系统之间失衡,使线粒体功能受损,诱发氧化损伤;高能饲粮能改善DSP处理引起的上述不良状况。
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