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目的研究强骨胶囊促进大鼠失神经支配骨折愈合的作用机理。方法雄性SD大鼠,10%水合氯醛腹腔麻醉,在距坐骨结节0.5cm处切断坐骨神经,横形截断股骨中段,建立失神经支配骨折动物模型,造模成功后,将大鼠随机分为强骨胶囊大剂量组、强骨胶囊中剂量组、强骨胶囊小剂量组、丹参组和空白对照组,每组30只。强骨胶囊大剂量组,给予强骨胶囊180mg/kg/d灌胃,每日一次;强骨胶囊中剂量组,给予强骨胶囊90mg/kg/d灌胃,每日一次;强骨胶囊小剂量组,给予强骨胶囊45mg/kg/d;丹参组,给予丹参注射液40mg/kg/d,灌胃,每日一次;空白对照组,遭摸后不作处理。各组大鼠分别在术后1周、2周和3周取骨折中心上下各1cm全段股骨标本,测算骨痂体积。骨痂取材切片,常规HE染色,观察骨痂结构。NGF、BMP-2和bFGF免疫组织化学染色,凝胶成像分析系统计算每个视野阳性细胞数。检测血清Ca、P和ALP。结果(1)骨痂体积测算结果:术后1周,各组骨折处均可见增粗。强骨胶囊大剂量组和强骨胶囊中剂量组骨痂体积值大于丹参组(P＜0.05)和空白对照组(P＜0.05),强骨胶囊小剂量组骨痂体积值大于空白对照组(P＜0.05)。术后2周,各组骨痂体积均有不同程度的增大。强骨胶囊大剂量组和强骨胶囊小剂量组骨折断端新生软骨量增多,骨痂外直径增生显著。强骨胶囊大剂量组骨痂体积明显大于丹参组(P＜0.01)、空白对照组(P＜0.01)和强骨胶囊小剂量组(P＜0.01),中剂量组骨痂体积明显大于空白对照组(P＜0.01)和丹参组(P＜0.05),强骨胶囊小剂量组大于丹参组(P＜0.05)和空白对照组(P＜0.05)。术后3周,强骨胶囊大剂量组骨缺损消失,骨痂外直径增粗,骨痂生长更明显,强骨胶囊中剂量组和强骨胶囊小剂量组骨折处有骨性骨痂形成,丹参组和空白对照组骨痂增生不明显。强骨胶囊大剂量组和强骨胶囊中剂量组骨痂体积达到高峰且大于丹参组(P＜0.01)和空白对照组(P＜0.01),强骨胶囊大剂量组也大于强骨胶囊小剂量组(P＜0.05),强骨胶囊小剂量组大于丹参组(P＜0.05)和空白对照组(P＜0.05)。(2)HE染色结果:术后1周,强骨胶囊大剂量组成骨细胞数目多于其余各组,其它各组以血肿和炎性渗出为主要表现,软骨细胞较少。术后2周,强骨胶囊大剂量组可见软骨骨痂和骨性骨痂,软骨细胞团周边有少量编织骨形成。强骨胶囊中剂量组有少量新生骨小梁,骨折断端内外形成骨样组织。其余各组纤维性骨痂生成明显。术后3周,强骨胶囊大剂量组类骨质较多,外骨痂明显增多。强骨胶囊中剂量组骨小梁排列不规则。强骨胶囊小剂量组骨折处新生软骨已接近全部骨化。丹参组新生血管丰富,骨小梁排列紊乱。空白组纤维骨痂消失,代之以软骨骨痂与骨性骨痂。(3)免疫组化染色结果:NGF:术后1周,强骨胶囊大剂量组骨折断端纤维母细胞与少量的软骨细胞NGF阳性颗粒染色呈淡棕黄色,阳性细胞数明显多于中剂量组(P＜0.01)和强骨胶囊小剂量组(P＜0.01),强骨胶囊中剂量组多于空白对照组(P＜0.05)。术后2周,强骨胶囊中剂量组和强骨胶囊小剂量组成骨细胞胞浆内有阳性颗粒,强骨胶囊中剂量组阳性颗粒多于丹参组(P＜0.05)和空白对照组(P＜0.05)。强骨胶囊大剂量组阳性细胞数明显多于丹参组(P＜0.01)和空白对照组(P＜0.01)。术后3周,强骨胶囊中剂量组和强骨胶囊小剂量组骨痂成骨细胞染色阳性,强骨胶囊中剂量组和强骨胶囊小剂量组阳性细胞数多于大剂量组(P＜0.05)。强骨胶囊大剂量组成骨细胞轻度着色染色阳性。BMP-2:强骨胶囊大剂量组BMP-2阳性细胞数在术后1、2周时呈上升趋势,第2周时达到高峰,第3周时降低。中剂量组BMP-2阳性细胞数在术后第3周时高于其他组,与空白对照组和丹参组相比差异有显著性(P＜0.01)。bFGF:术后1周,强骨胶囊大剂量组和强骨胶囊中剂量组纤维骨痂中的成纤维细胞和血管内皮细胞,未分化间充质细胞及幼稚的成骨细胞有较均匀的棕色细颗粒状bFGF呈阳性表达,强骨胶囊中剂量组阳性细胞数明显多于强骨胶囊小剂量组(P＜0.05)、对照组(P＜0.05)和丹参组(P＜0.05)。术后2周,强骨胶囊大剂量组和强骨胶囊中剂量组在成骨细胞和幼稚的软骨细胞、新生骨基质和外骨膜成骨细胞bFGF表达阳性,阳性细胞数上升至高峰,明显多于空白对照组(P＜0.01)和丹参组(P＜0.01)。术后3周,强骨胶囊大剂量组阳性细胞数量及阳性反应程度较前明显下降,着色程度较前减弱,与空白对照组和丹参组相比有统计学意义(P＜0.05)。其它各组染色较浅,阳性细胞数明显减少。(4)血清Ca、P和ALP结果:术后1周,各组之间血清Ca浓度无明显差异(P＞0.05);术后2周,强骨胶囊中剂量组血清Ca浓度高于其他组,与丹参组相比(P＜0.01)、与对照组相比(P＜0.05),与大剂量组之间相比差异无显著性(P＞0.05)。术后3周,强骨胶囊小剂量组血清Ca浓度最高,与丹参组相比(P＜0.05)和空白对照组相比(P＜0.05),其他各组比较差异均无显著性(P＞0.05)。术后1周,各组之间血清P浓度无明显差异(P＞0.05);术后2周,强骨胶囊小剂量组血清磷浓度降低较明显,强骨胶囊大剂量组与小剂量组和空白对照组相比(P＜0.05);术后3周,各组血清P浓度均下降,强骨胶囊中剂量组下降最明显,强骨胶囊大剂量组和中剂量组与小剂量相比(P＜0.05)。术后第1、2、3周,除丹参组在第2周下降外,其余各组血清中ALP浓度均升高。术后第1周时,强骨胶囊小剂量组ALP浓度高于空白对照组(P＜0.05),其余各组差异无显著性(P＞0.05)。术后第2周时,强骨胶囊中剂量组血清ALP浓度升高明显,与丹参组相比(P＜0.01)、强骨胶囊小剂量组(P＜0.05)及空白对照组(P＜0.05),但与大剂量组之间的比较差异无显著性(P＞0.05)。大剂量组与丹参组相比(P＜0.05)。术后第3周时,大剂量组的血清ALP升高更明显,大剂量组与丹参组相比(P＜0.01)、强骨胶囊小剂量组相比(P＜0.05)及中剂量组相比(P＞0.05),而其余各组之间的比较差异无显著性(P＞0.05)。结论1.失神经支配骨折的修复与细胞因子的表达有关。2.强骨胶囊能通过诱导NGF、bFGF和BMP-2的表达促进失神经支配骨折的修复。3.强骨胶囊能改善神经元修复过程中的微环境,促进骨痂生成、生长质量,促进失神经支配骨折的愈合速度。