褪黑素在PHN中的镇痛作用及其对MT2受体、δ阿片受体和NO表达的影响

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目的:探讨褪黑素(melatonin,MT)在大鼠带状疱疹后神经痛(post-herpetic neuralgia,PHN)模型中的镇痛作用及其可能的作用机制。  方法:成年Wistar大鼠80只,雌雄不限,3月龄,体重180-230g,皮下接种HSV-1(1×108 PFU/ml)50ul,于接种30天后进行带状疱疹后神经痛判定,选择PHN造模成功的大鼠48只,按照随机数字表法将PHN大鼠分为3组(n=16),A组腹腔注射不同剂量MT:A1 MT30mg/kg,A2MT60mg/kg,A3 MT120mg/kg,A4对照组;B组侧脑室注射不同剂量MT:B1 MT0.25mg/kg,B2 MT0.5mg/kg,B3 MT1.0mg/kg,B4对照组;C组:C1纳洛酮(naloxone,Nal)10ug+MT120mg/kg,C24P-PDOT(10ug)+MT120mg/kg,C3左旋精氨酸(L-arginine,L-arg)80ug+MT120mg/kg,C4 MT120mg/kg;其中纳洛酮、4P-PDOT、左旋精氨酸于侧脑室注射10分钟后给予MT(120mg/kg,i.p)。A、B、C3组于注射MT后20分钟、40分钟、80分钟时测定大鼠机械痛觉反应评分;绘制MT(i.p)和MT(i.c.v)不同途径给药的量效曲线,并于注射MT40分钟时计算两种途径给药的镇痛效应A50;之后采用实时荧光定量PCR法分别测定正常组大鼠、PHN组大鼠及PHN+MT(120mg/kg,ip)组下丘脑中褪黑素MT2受体、δ阿片受体 mRNA表达水平的变化,硝酸还原酶法分别测定上述三组脑组织中一氧化氮(Nitric-oxide,NO)含量。  结果:1、PHN组机械痛觉反应评分(1.25±0.43)较正常组(0.62±0.36)升高(P<0.05);2、MT(i.p)镇痛效应A50=24.709mg/kg,MT(i.c.v)镇痛效应 A50=0.363mg/kg;3、A组、B组机械痛觉反应评分降低(P<0.05),C组大鼠机械痛觉反应评分升高(P<0.05);4、PHN大鼠下丘脑中MT2受体、δ阿片受体 mRNA表达水平降低(与正常大鼠比较,P<0.05),PHN+MT(120mg/kg,ip)组下丘脑中MT2受体、δ阿片受体mRNA表达水平升高(与PHN组比较,P<0.05);5、PHN大鼠脑组织NO含量表达较正常组升高(P<0.05),PHN+MT(120mg/kg,ip)组脑组织中NO含量表达降低(与PHN组比较,P<0.05)。  结论:褪黑素在大鼠带状疱疹后神经痛中具有镇痛作用,其作用部位可能主要位于中枢神经系统内,褪黑素在PHN中的镇痛机制可能与上调下丘脑中MT2受体、δ阿片受体的表达水平及降低脑组织一氧化氮的释放有关。
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