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实验背景:神经胶质瘤作为在脑部和脊髓中广泛存在的肿瘤,在中枢神经系统肿瘤中占到40%,年发病率高达3-8人每10万人。Tagln3在神经元发育和多种精神疾病与神经疾病上都扮演着重要作用,有文献报道和临床分析数据显示,Tagln3在神经胶质瘤中相比正常的脑组织处在低表达水平。故Tagln3在神经胶质瘤中可能发挥一定的调控作用,其背后的机制有助于了解中枢神经系统疾病与肿瘤发生之间的关系。实验方法与结果:我们使用Western Blot和qPCR的方法检测了 Tagln3在小鼠组织中的表达量,发现Tagln3在脑组织中特异性表达。同样在正常胶质细胞HEB和三种胶质瘤细胞GBM、U251和U87中检测了 Tagln3的表达水平,发现Tagln3在神经胶质瘤细胞中低表达。使用pEGFP-C1质粒构建了 Tagln3的真核表达载体。在U251细胞中过表达Tagln3能够抑制细胞的增殖,而用siRNA敲降Tagln3的表达促进了细胞的增殖。用流式细胞仪检测Tagln3对U251细胞周期的影响,发现过表达Tagln3能使U251细胞发生S期阻滞,从而抑制细胞的增殖。流式细胞仪检测过表达Tagln3对U251细胞凋亡的影响,发现Tagln3能促进细胞的凋亡状态,同时我们也检测到了抗凋亡蛋白Survivin的表达被抑制。我们构建了 Tagln3的原核表达质粒并纯化了 GST-Tagln3标签蛋白,利用GSTlarge scale pull down实验结合质谱分析,在U251细胞中找出了 Tagln3的相互结合蛋白eEF1A2,验证了 Tagln3缺失对eEF1A2的调控作用,在过表达Tagln3的U251细胞中分别过表达和敲降eEF1A2,通过MTT增殖实验发现eEF1A2对Tagln3调控的细胞增殖有协同作用,eEF1A2可能参与到Tagln3对U251细胞的信号通路中。通过对关键信号通路蛋白的Western Blot检测,上调Tagln3的表达量对AKT途径没有显著影响,而ERK的信号被激活,GSK3的活性受到抑制,原癌基因c-MYC的表达被显著抑制。结论:Tagln3在U251细胞中与eEF1A2存在相互作用,并协同参与神经胶质瘤的调控。Tagln3能通过激活U251细胞中的ERK信号通路、抑制GSK3的活性和c-MYC的表达起到抑制细胞的增殖与促进细胞凋亡的作用。