目的：用不同浓度、不同时间大黄素作用于低分化细胞株人结肠癌RKO、中分化人结肠癌细胞株HT-29、高分化人结肠癌细胞株Caco-2，观察大黄素对不同分化程度的人结肠癌细胞体外增殖的抑制作用并探究其机理，同时观察大黄素联合化疗药物5-Fu的协同杀伤作用。　　 材料与方法：选用低分化细胞株人结肠癌RKO、中分化人结肠癌细胞株HT-29、高分化人结肠癌细胞株Caco-2作为研究对象：1、噻唑蓝(MTT)比色法、倒置显微镜显像来研究大黄素对三株人结肠癌细胞的体外增殖抑制作用；2、流式细胞术、Caspase-3分光光度法探讨大黄素对三株细胞周期与凋亡的作用；3、噻唑蓝(MTT)比色法检测大黄素联合化疗药物5-Fu对三株细胞的协同杀伤作用；4、采用SPSS16.0统计软件进行统计分析。　　 结果：1、MTT比色法结果显示大黄素能够明显抑制三株不同分化程度的人结肠癌细胞体外增殖，且抑制率呈浓度、时间依赖趋势（100μM大黄素作用RKO、HT-29、Caco-272h其抑制率分别为57.41％、65.02%、78.82%，与对照组相比有统计学差异P＜0.05)；形态学观察（倒置显微镜）显示，随着浓度的升高以及大黄素作用时间的延长，细胞数量逐渐减少，且镜下部分细胞形态发生变化，出现细胞皱缩，贴壁能力下降。2、流式细胞术与Caspase-3分光光度法实验结果显示：大黄素诱导三株细胞发生细胞凋亡，凋亡率呈浓度、时间依赖趋势，且与Caspase-3蛋白的表达呈正相关；大黄素对细胞的作用与分化程度相关，细胞分化程度越低，大黄素抑制率越低，但细胞凋亡率越高（如25μM大黄素作用RKO、HT-29、Caco-272h其细胞凋亡率分别为18.74%、7.68%、9.50%，与对照组相比有统计学差异P＜0.05）；大黄素阻滞低分化人结肠癌细胞RKO于S期，阻滞中分化细胞HT-29于G2/M期，阻滞高分化细胞Caco-2于G0/G1期。3、在作用时间短(24h)、浓度低(大黄素25μM、5-Fu0.025μM)的情况下，大黄素能够显著增强5-Fu的抑制细胞增殖作用。　　 结论:1、大黄素浓度、时间依赖性抑制三株不同分化程度的人结肠癌细胞RKO、HT-29、Caco-2的体外增殖，其机制可能与其阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡、激活Caspase-3蛋白有关。2、大黄素对三株人结肠癌细胞具有不同的细胞周期阻滞作用，将低分化人结肠癌细胞株RKO阻滞于S期，将中分化细胞株HT-29阻滞于G2/M期，高分化细胞株Caco-2阻滞于G0/G1期。3、大黄素对三株人结肠癌细胞的作用与细胞分化程度有关，体外增殖抑制作用与细胞分化程度正相关，导凋亡作用与细胞分化程度负相关。4、大黄素能够增强三株不同分行化程度的人结肠癌细胞对化疗药物5-Fu的敏感性，增强5-Fu对细胞的抑制杀伤作用。