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由于肿瘤、炎症、损伤和发育异常等原因导致的骨缺损在临床上很常见。常用的修复方法都有一定的缺陷。如自体骨移植的骨来源有限,且供区有一定的并发症;异体骨移植存在免疫排斥反应等。因此,骨缺损的修复一直是临床上的一个难题。组织工程科学的出现及骨组织工程的迅速发展,使这一问题的解决成为可能。在骨组织工程研究中,选择合适的支架材料是一个重要的研究方向。理想的支架材料应具有三维的空间结构,细胞可以在其中生长并构建组织。藻酸是从海藻中提取的多糖物质,在钙离子等二价阳离子存在时通过离子交联作用聚合成开放晶格形式的水凝胶。藻酸钙可保持良好形态,无毒性,已被成功地用于组织工程的研究。本实验即以藻酸钙为成骨细胞载体,观察骨组织的形成及骨缺损的修复过程。 1.以藻酸钙为载体的可注射性组织工程骨的初步研究 目的:应用组织工程技术探索可注射性组织工程骨的可行性。方法:从兔髂骨骨髓细胞中获取骨髓基质成骨细胞,将骨髓基质成骨细胞与2.0%藻酸钠溶液混合形成骨髓基质成骨细胞/藻酸钠复合物,使细胞的终浓度为5×10~6/ml。将骨髓基质成骨细胞/藻酸钠复合物用氯化钙固化为凝胶体,注射于裸鼠背部皮下。结果:注射后4周、8周注射物在裸鼠背部皮下形成硬结节,X光片均显示有明显成骨现象。组织学分析显示标本有大量新骨形成,并具有骨髓腔样结构。结论:应用藻酸钠复合骨髓基质成骨细胞可以通过注射方式在动物体内形成骨组织。 2.骨髓基质成骨细胞接种于藻酸钙修复兔颅骨缺损的实验研究 目的:在骨缺损中植入成骨细胞和藻酸钙复合物,观察缺损的修复情况。方法:体外扩增兔骨髓基质成骨细胞,将骨髓基质成骨细胞与2.0%藻酸钠溶液混合形成骨髓基质成骨细胞/藻酸钠复合物,使细胞的终浓度 第四军医大学硕士论文 为 5 XIO’/IIl。将骨髓基质成骨细胞/藻酸钠复合物用氯化钙固化为凝胶 体,植人细胞供体兔颅骨直径15nun缺损中,以单纯植入藻酸钙凝胶作 为对照。术后8周取材,通过大体观察、X线检查组织学检查观察骨缺损 的修复情况。结果:骨髓基质成骨细脚藻酸钙凝胶植人8周后,缺损大 部分获得修复,组织学分析显示缺损中有大量新骨形成。结论:应用藻酸 钙复合骨髓基质成骨细胞可以提高骨缺损修复效果。