地衣芽孢杆菌联合中药提取物应用的初步研究

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益生菌和中药提取物对机体均有良好的保健作用,能否保持各自的优点联合应用,对药品研发具有深远的指导意义。本研究通过对比试验选择适合的益生菌,采用检测表型特征的常规方法结合现代分子生物学PCR方法鉴定益生菌,用溶血性实验及小鼠致病性实验评价益生菌的安全性,根据多糖含量变化、细菌生长曲线与活菌数计数方法观察益生菌与中药提取物共培养的相互影响,采用抑菌试验研究益生菌与中药提取物共培养对致病菌的作用,试验结果如下:试验一、3种益生菌的对比筛选试验。将益生菌(30亿cfu/mL)按0.1mL/10g小鼠体重进行灌胃。结果,各试验组的小鼠脾脏指数、胸腺指数差异不显著(P>0.05)。混合菌组鼠在试验第7天增重率为0.72±0.04g/d增重显著高于对照组(P<0.05),第14天丁酸梭菌组的增重率为1.57±0.05g/天增重显著高于对照组(P≤0.05)。在植物乳杆菌组和混合菌组三个阶段内均出现小鼠剖检异常。试验二、LYD芽孢杆菌的鉴定与抵抗力试验。采用传统方法及分子生物学方法鉴定LYD芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌。11种防腐消毒药耐受力试验,结果2%氢氧化钠、3%双氧水对地衣芽孢杆菌有杀灭作用。采用纸片法进行体外抑菌试验,结果24种抗菌药物中地衣芽孢杆菌对阿莫西林和氨苄西林不敏感。采用鸡血和兔血对地衣芽孢杆菌进行溶血性试验,结果均无溶血环。给小鼠灌胃30亿cfu/mL浓度的地衣芽孢杆菌,没有出现死亡。试验三、地衣芽孢杆菌与黄芪多糖、双花连翘提取物共培养试验。糖发酵试验结果表明地衣芽孢杆菌能发酵含黄芪多糖和双花连翘提取物的混合培养基;双花连翘提取物对地衣芽孢杆菌的MIC试验,结果1mg/mL浓度的双花连翘提取物对地衣芽孢杆菌没有抑制作用;双花连翘提取物对致病菌的抑制试验,结果表明其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、葡萄球菌、普罗威登菌4种致病菌有抑制作用。共培养物对这4种致病菌同样有抑制作用。综上所述:从三种益生菌中筛选出LYD芽孢杆菌。LYD芽孢杆菌经鉴定为地衣芽孢杆菌,能耐受9种常规消毒药,阿莫西林和氨苄西林对其无抗菌作用,小鼠口服3×109cfu/mL该菌安全。地衣芽孢杆菌能与黄芪多糖一双花连翘提取物联合应用。
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