目的：间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)是一种成体干细胞,具有造血支持、免疫调节和自我更新的能力,并有多向分化潜能。异基因造血干细胞移植(allo-hematopoietic stem cell transplantation, allo-HSCT)是血液系统疾病最有效的治疗手段之一,而在移植过程中及移植后,难免会遇到诸如造血微环境的破坏、干细胞归巢及移植物抗宿主病(graft versus host diease, GVHD)等问题,均影响移植成败。其中,aGVHD是allo-HSCT后普遍存在的棘手问题,aGVHD的成功防治对提高HSCT成功率具有重要意义。很多研究已经证实,MSC能够通过抑制树突状细胞的诱导生成及成熟、降低T细胞增殖及减少细胞毒T细胞的形成等多种机制来发挥其免疫调控作用,通过输注骨髓来源的MSC可安全有效的治疗aGVHD,因此,MSC是预防和治疗aGVHD的一种细胞治疗途径。体外研究发现,人羊膜间充质干细胞(amniotic mesenchymal stem cells, AMSC)具有和骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell, BMMSC)相似的免疫表型、多向分化潜能及造血支持作用,有望成为一种更理想的MSC临床及科研新来源。我们前期的体外研究已经证实,AMSC具有低免疫原性,能够抑制人外周血淋巴细胞的转化,并且此抑制作用具有剂量依赖性。本课题第一部分旨在研究应用人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)于NPG小鼠以构建异种移植aGVHD模型。第二部分在第一部分成功构建小鼠异种移植aGVHD模型的基础之上,进一步研究人AMSC对异种移植aGVHD的相关影响。以期为AMSC的临床应用奠定理论基础,同时希望为临床提高MSC的移植疗效提供实验依据。方法：第一部分通过尾静脉将经新鲜及库存来源的健康人外周血分离出的PBMC输注入经亚致死剂量照射后的NPG小鼠体内,建立NPG小鼠的异种移植物抗宿主病(X-GVHD)模型。观察输注后小鼠的日常活动、体重、血象变化,应用苏木素-伊红(H&E)染色技术给小鼠各脏器做相关病理学检查,比较输注两种来源的人PBMC所建立的小鼠异种移植模型的差异性。第二部分采用组织块法从人羊膜组织中分离并常规培养AMSC,在第一部分成功建立X-GVHD模型的基础上给小鼠静脉注射AMSC,注射后同样观察小鼠的日常活动、体重、血象变化,应用苏木素-伊红(H＆E)染色技术给小鼠各脏器做相关病理学检查,并采用流式细胞术和免疫荧光技术,检测人T细胞在小鼠外周血、组织及器官中的浸润情况,通过比较各指标间的差异性从而确定AMSC对aGVHD的影响及作用。结果：1、相对于库库存血来源的人PBMC,应用新鲜血来源的人PBMC尾静脉注射于NPG小鼠更容易成功建立异种移植aGVHD模型,其建模效果更显著;2、AMSC静脉输注于小鼠异种移植模型能减轻aGVHD症状(倦怠、弓背、耸毛、体重减轻等),改善靶器官(肺、肝脏、脾脏、肠)的病理损伤。AMSC共输注明显降低了小鼠体内人源T淋巴细胞(CD3+、CD45+)比例,提高了CD4+/CD8+T细胞比值。结论：应用新鲜血来源的人PBMC尾静脉注射于NPG小鼠更容易成功爹立异种移植aGVHD模型,且其建模效果更为显著;静脉注射人AMSC于小鼠异种移植aGVHD模型对急性移植物抗宿主病有抑制作用。