【摘 要】
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目的：研究短期缺氧/复氧对大鼠血管平滑肌细胞myocardin基因表达的影响。 方法：无菌条件下取出大鼠胸主动脉,留取中膜,运用组织贴块法培养,采用第4-7代细胞进行实验,实验前
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目的：研究短期缺氧/复氧对大鼠血管平滑肌细胞myocardin基因表达的影响。
方法：无菌条件下取出大鼠胸主动脉,留取中膜,运用组织贴块法培养,采用第4-7代细胞进行实验,实验前用含1％血清的DMEM培养基静止细胞24小时。自制缺氧装置,检测其缺氧效果,建立体外细胞缺氧方案,通过观察细胞形态学变化、死亡细胞记数等,判断缺氧刺激对体外培养平滑肌细胞活性的影响。提取细胞总RNA,用RT-PCR法,以α-Actin为内对照,研究平滑肌细胞在缺氧及复氧后不同时间段myocardin mRNA的表达变化。
结果：
1、运用组织贴块法成功培养原代细胞,培养细胞呈典型的‘峰谷’样生长,可满足实验的需要。
2、自制缺氧装置24小时内氧分压明显降低且PH值波动不明显。对体外细胞实施缺氧氧方案后,24小时内未见明显细胞肿大、漂浮和坏死现象。
3、RT-PCR结果表明与正常对照组相比,平滑肌细胞myocardin mRNA表达在缺氧后逐渐降低(P<0.05)。缺氧8h降低最明显。且随着缺氧时间的延长,myocardin基因的表达水平逐渐回升,并增高；缺氧24小时复氧后,其表达水平逐渐回落,复氧8小时时接近正常表达水平。
结论：缺氧/复氧影响大鼠血管平滑肌细胞myocardin基因的表达。
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