应用理论计算方法对有机磷化合物参与的重要生化反应分子机制的研究

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磷作为生物体内的必要元素之一,其相关研究涉及化学、生物等各个领域。有机磷化合物参与了许多重要的生物体内生化反应,对相关反应分子机制的研究具有十分重要的生物学意义。本论文利用理论计算的方法,分别针对高压对磷活化氨基酸成肽反应的影响、蛋白激酶磷酸根转移以及钌(Ⅱ)催化的磷酰基导向邻位选择C-H活化反应,以上三种磷参与的反应分子机制进行了系统研究,为更好地理解相关反应的本质提供理论支持。具体来讲,包括以下三方面内容:一、现代生命起源学说普遍认为生命来源于原始海洋,其中小分子合成大分子是重要的阶段之一,氨基酸在水溶液中的缩合反应是一个较为困难的过程,而海底热液系统所具有的高温、高压特性对于促进生化反应有很大的作用。我们通过实验和理论相结合的方法讨论了氨基酸在不同压力、温度下的成肽过程,同时以苯丙氨酸和甘氨酸为例,通过理论计算研究二肽的具体形成机制,对苯丙氨酸成肽产率较甘氨酸低,而其受高温高压影响更大等问题给出合理的理论解释。二、现有的生物信息学研究成果表明,P-N键和P-O键均存在于蛋白激酶的磷酸根转移过程当中,据此我们提出了三步完成的“排球机理”这一种新机制假设,即整个过程经过P-N中间体、P-O中间体、磷酰基转移三个步骤。该机理与目前世界上普遍认为的“乒乓机理”不同,过程中包含了碱性氨基酸参与反应的P-N重要中间体的形成。本论文以丝氨酸蛋白激酶PKA为研究对象,采用现代量子计算方法对其磷酸根转移的“排球机理”进行验证,相关数据进一步支持了 P-N中间体形成的客观性。三、运用DFT计算方法,对最近报道的两个钌(Ⅱ)催化的磷酰基导向邻位选择C-H活化反应进行了理论探究。计算结果说明,基于(R2P(O)和RP(O)OH)的磷酰基不同特性,可以以不同的反应历程,合成两种不同的产物。对R2P(O)来说,整个催化循环包括三个步骤:C-H活化,炔烃插入和质子化。钌中心的氧化态在这里没有发生改变。而在RP(O)OH体系中,整个催化循环包括四个步骤:C-H活化、炔烃插入、还原消除和催化循环。RP(O)OH中的羟基引发了Ru(Ⅱ)/Ru(O)催化循环。另外,发现大部分的步骤更倾向于带正电的中间体和过渡态,这与实验中添加剂AgSbF6和KPF6能够有效提高产率的结论一致。
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