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鲍曼不动杆菌是引起医院感染的重要病原菌,广泛分布于自然界、医院环境和人体皮肤表面,其分离率在非发酵菌中仅次于绿脓假单孢菌。在免疫力低下的患者中,可以引起导管相关性肺炎、败血症、泌尿系统感染、脑膜炎等严重的感染。随着抗生素的广泛使用,多重耐药(同时耐3种以上不同类型的抗生素,如β-内酰胺类、氨基糖甙类、氟喹喏酮类等)的鲍曼不动杆菌的比例逐年增加,在重症监护病房、血液病房引起的爆发流行病死率很高。研究发现鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药的机制除外膜通透性的降低、外膜孔蛋白的丢失和主动外排等外,产β-内酰胺酶是最主要的原因。由于院内多重耐药鲍曼不动杆菌感染在近年才被发现,国内外对其耐药性的研究均处于起步阶段,对其产酶情况也仅有少量报到。因此,本研究以2004年4月～2004年9月从第三军医大学附属西南医院临床标本中分离到的鲍曼不动杆菌多重耐药菌株为研究对象,确定其耐药谱,并采用PCR扩增其耐药基因,通过基因测序和同源性分析了解其产β-内酰胺酶情况。并对其中一株鲍曼不动杆菌产生的AmpC型β-内酰胺酶利用分光光度法进行了酶动力学及抑酶效应的研究。以期为临床合理使用抗生素控制鲍曼不动杆菌感染提供实验依据。本研究分四部分进行:1.鲍曼不动杆菌耐药性的流行病学调查及产?-内酰胺酶的粗筛2.院内感染鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶PCR分析3.鲍曼不动杆菌携带β-内酰胺酶基因测序及同源性比较4.鲍曼不动杆菌04-565 AmpC酶动力学及抑酶效应的研究1.方法1.1药物敏感性和产β-内酰胺酶分析药物敏感性采用K-B纸片法和琼脂稀释法;产β-内酰胺酶情况用头孢硝噻吩纸片检测;复合纸片表型确证法粗筛产ESBLs菌株;三维实验检测其产AmpC酶的情况。1.2产β-内酰胺酶基因分析设计不同的β-内酰胺酶针对性引物,分别以细菌的染色体和质粒为模板,PCR分析确定产β-内酰胺酶基因,并进行产物测序和同源性比较。