论文部分内容阅读
在发展中国家,为了适应肉类和乳制品需求量的增加,给家畜提供稳定和营养丰富的饲料变得十分重要。甜高粱(Sorghum bicolor)、王草(Pennisetum purpuphoides)和象草(Pennisetum purpureum)广泛种植于热带和亚热带地区,是满足动物生产需要的优良牧草资源。但是,其水溶性碳水化合物含量低、水分含量和缓冲能高,因此很难调制出优质的青贮饲料。近年来,接种青贮用乳酸菌添加剂是一种提高青贮饲料发酵品质的有效方法。然而,由于商业乳酸菌添加剂在热带和亚热带地区的适应性差,常常不能提高牧草的青贮发酵品质。一般来说,热带牧草上附生的乳酸菌具有良好的适应性。因此,分离和应用这些乳酸菌来调制优质青贮饲料,具有重要意义。本研究旨在从王草中分离、筛选、生理生化评价和鉴定出优良乳酸菌菌株,验证其和商业乳酸菌添加剂提高甜高梁,象草和王草发酵品质和家兔生长性能的效果。研究结果如下。1.王草中分离的乳酸菌特性和分子鉴定对从王草中分离出的76株乳酸菌进行耐热试验,筛选出的5株乳酸菌进行形态学、生理生化特性分析和16S rRNA鉴定。结果如下,5个菌株均能在pH 3.5、4.0、4.5、5.0、6.5、7.5和8.0,温度35℃、40℃、45℃和50℃下生长良好,并能耐受3.0%、6.5%和9.5%的NaCl。一株菌被鉴定为植物乳杆菌HDASK,其他菌株分别被鉴定为乳酸片球菌SK3907、SK2A32、SK3A42和ASKDD。其中,植物乳杆菌HDASK、乳酸片球菌SK3907和ASKDD被视为具有潜力的乳酸菌株,用于后续的试验。2.筛选出的乳酸菌对甜高粱青贮饲料发酵品质的影响研究了不添加(SKC,对照组)、添加三种乳酸菌菌株(SKA,植物乳杆菌HDASK;SKB,乳酸片球菌SK3907;SKD,乳酸片球菌ASKDD)和商业乳酸菌添加剂(SKP,商业用植物乳杆菌)对甜高粱青贮饲料发酵品质的影响。用实验室青贮窖室温条件下,青贮1,3,5,7,14,30,60和90天后,取样分析青贮饲料的发酵品质。与对照组相比,乳酸菌添加组在整个青贮阶段均显著降低了 pH、好氧性细菌和酵母菌数量、乙酸、氨态氮、丁酸、乙醇和丙酸含量(P<0.05),显著提高了乳酸含量和乳酸菌数量(P<0.05)。与其它的乳酸菌处理相比,SKD的pH最低,乳酸和水溶性碳水化合物含量最高(P<0.05)。由此可见,乳酸片球菌ASKDD提高甜高粱青贮饲料发酵品质的效果优于商业乳酸菌添加剂。3.筛选的乳酸菌对象草青贮饲料发酵品质的影响研究了不添加(EKC,对照组)、添加三种乳酸菌菌株(EKA,植物乳杆菌HDASK;EKB,乳酸片球菌云SK3907;EKD,乳酸片球菌ASKDD)和商业乳酸菌添加剂(EKP,商业用植物乳杆菌)对象草青贮饲料发酵品质的影响。用实验室青贮窖室温条件下,青贮3天,5天,7天,14天和30天后,取样分析青贮饲料的发酵品质。与对照组相比,乳酸菌处理组在每个青贮时间点均显着降低了 pH、乙酸和乙醇的含量(P<0.05),显著提高了乳酸含量(P<0.05),提高了青贮发酵品质;而且乳酸菌处理组均在青贮14天和30天后显着降低了氨态氮含量(P<0.05)。与EKP组相比,EKA,EKB和EKD组的pH更低,乳酸含量更高(P<0.05)。由此可见,植物乳杆菌HDASK、乳酸片球菌SK3907和ASKDD提高象草青贮饲料发酵品质的效果优于商业乳酸菌添加剂。4.筛选的乳酸菌提高王草青贮饲料发酵品质的效果研究了不添加(SKC,对照组)、添加两种乳酸菌菌株(SKA,植物乳杆菌HD ASK;SKI,类植物乳杆菌SKI,本实验室前期分离所得)和商业乳酸菌添加剂(SKP,商业用植物乳杆菌)对王草青贮饲料发酵品质的影响。用实验室青贮窖室温条件下,青贮1,3,5,7,14,30,60和90天后,取样分析青贮饲料的发酵品质。在各青贮90天后,与对照组相比,乳酸菌处理组均显著降低了 pH、乙酸和丁酸的含量(P<0.05),显著提高了乳酸含量(P<0.05),提高了青贮发酵品质。SKA,SKI和SKP组在pH,乳酸、丁酸和NH3-N含量方面均无差异(P>0.05)。由此可见,植物乳杆菌HDASK,植物乳杆菌SKI和商业乳酸菌添加剂提高王草青贮发酵品质的效果相同。5.筛选的乳酸菌处理后的王草青贮饲料对家兔生长性能的影响不添加(Control,对照组)、分别单独添加类植物乳杆菌SKI(SKI)和乳酸片球菌ASKDD(DD)、组合添加类植物乳杆菌SKI+乳酸片球菌ASKDD(SKI+DD)的王草,青贮30天后饲喂家兔,研究其改善家兔生产性能的效果。72只具有相似体重和外观的雄兔(6周龄)按完全随机区组设计,饲养在金属笼中,饲喂王草青贮饲料42天后,取样分析家兔的生产性状和血液生化指标。与对照组相比,乳酸菌处理组均未显著影响家兔的采食量、体增重和饲料转化率(P>0.05),降低了铜和锰的浓度(P<0.05),增加了血液中锌的浓度(P<0.05)。与对照组、SKI和SKI+DD组相比,饲喂DD组王草青贮饲料的家兔血液中的甘油三酯(2.94 U/L)和丙氨酸氨基转移酶(0.92 mmol/L)浓度增加(P<0.05)。与对照组、DD和SKI+DD组相比,饲喂SKI组王草青贮饲料的家兔血液中的超氧化物歧化酶(658.01 nmol/ml)、磷(5.1 mg/kg)和镁(2.43 mg/kg)的浓度增加(P<0.05)。由此可见,类植物乳杆菌SKI、乳酸片球菌ASKDD及其组合添加组在提高家兔抗氧化防御系统方面具有相同的优良效果。总之,与对照组相比,筛选得到的植物乳杆菌HDASK、乳酸片球菌SK3907和乳酸片球菌ASKDD提高了甜高梁、象草和王草青贮饲料的发酵品质。与商业乳酸菌添加剂相比,筛选得到的三株乳酸菌在提高甜高粱、象草和王草发酵品质的效果相同或更好。乳酸片球菌ASKDD和类植物乳杆菌SKI在改善家兔抗氧化防御系统方面具有相同的优良效果。乳酸片球菌ASKDD在调制优质青贮饲料和提高动物抗氧化防御能力方面具有潜在应用价值。